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JULIA606

新虫 (小有名气)

[求助] PCR后琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢?已有7人参与

各位大侠,新手最近因实验需要基因鉴定进行PCR后电泳,目的基因在290-370bp之间,目前用的100bp ladder,1%琼脂糖,跑了几次后发现 ladder在目的段跑的不是很开,区分不大,不知道琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢?鉴于经验有限,再次请教各位,期待大家的建议与指导~~!~O(∩_∩)O~
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暮色西荷

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
23楼: Originally posted by JULIA606 at 2015-12-17 17:58:20
这不是前后矛盾了么。。。浓度。。...

1、DNA maker是已知大小的DNA混合物,起对照指示目的条带大小的,就像你的目的条带不会随着胶浓度变化一样,它的各条带大小是固定的;2、提高胶浓度是为了减小胶的孔径,这样小的DNA能快速通过,而大的通过的慢,起到区分目的,建议看一下电泳的原理;3、配胶问题,不知道你目的是什么,如果只是鉴定回收目的条带,不必执着到底多少浓度的胶,配胶时损失一些是必然的,我们都敞口配的,使用完全没问题;

发自小木虫Android客户端
35楼2015-12-18 00:08:15
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oliviashane

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-12-17 15:03:02
膠的?舛扰c目的基因的大小有關,bp數大的用?舛鹊偷哪z跑,阻力小跑的快,反之bp數小的就用高?舛鹊哪z,跑得慢,條帶分離的清楚。

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-12-16 01:44:37
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JULIA606

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by oliviashane at 2015-12-16 01:44:37
膠的?舛扰c目的基因的大小有關,bp數大的用?舛鹊偷哪z跑,阻力小跑的快,反之bp數小的就用高?舛鹊哪z,跑得慢,條帶分離的清楚。

打算试试不同浓度的胶跑跑ladder看
3楼2015-12-16 08:44:16
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Heao_

新虫 (初入文坛)

4楼2015-12-16 11:09:46
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