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txyu

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC液相色谱图基线问题 已有2人参与

1200HPLC液相,开启软件平衡柱子时出现如下谱图,基线呈规律波动
排查原因:
1.进气泡  purge后情况未改观;
2.柱头或管路污染  用异丙醇冲洗  各相100%洗脱 purge时压力忽高忽低,甚至大于400,仪器报警,抑或70左右。怀疑混合管路有污染,各项25%异丙醇洗脱40min,换超纯水洗脱1h,换50%甲醇,0.4ml/min洗脱4h.
情况未改观,会是什么原因呢 ?求大神指导

HPLC液相色谱图基线问题
1.JPG


HPLC液相色谱图基线问题-1
2.JPG
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学术巨星

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
查看一下紫外灯的强度和累计使用时间,
初步怀疑是紫外灯到寿命了,该更换了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-12-14 21:29:56
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学术巨星

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
txyu: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-12-15 10:38:50
引用回帖:
7楼: Originally posted by 学术巨星 at 2015-12-15 08:29:21
首先,明确一点:你图上基线规律波动的信号是DAD的信号,并不是压力的信号。
其次,如你所说,出现基线信号的波动后,你才怀疑柱头或管路污染  用异丙醇冲洗,或者purge,采取相应措施后并基线波动并没有解决。
...

我仍然保留原来的建议:
查看一下紫外灯的强度和累计使用时间,
初步怀疑是紫外灯到寿命了,该更换了。
8楼2015-12-15 08:39:07
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txyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 学术巨星 at 2015-12-15 10:16:46
我没用过这个仪器,你还是问你学校用过的人,或者打电话给客服吧。...

恩恩,刚才查看了,已工作4000多个小时,的确不行了,此外purge压力过大,估计白头也得换了,非常感谢您~~
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11楼2015-12-15 10:38:40
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txg1817

木虫 (小有名气)

我在用75%乙腈、25%水作流动相时出现过类似情况,预先将二者混合后基本解决了。
12楼2015-12-16 09:13:19
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竹水月

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
压力不稳跟灯关系不大吧,入口主动阀有问题吧

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-14 22:11:43
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竹水月

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你把入口球阀摘下来,阀芯用异丙醇超声洗净后换上试试,结构比较复杂,拆开注意

发自小木虫Android客户端

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4楼2015-12-14 22:15:44
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txyu

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 学术巨星 at 2015-12-14 21:29:56
查看一下紫外灯的强度和累计使用时间,
初步怀疑是紫外灯到寿命了,该更换了。

应该不是灯的问题,现在purge时压力都会警报

发自小木虫IOS客户端
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5楼2015-12-14 22:30:57
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txyu

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 竹水月 at 2015-12-14 22:15:44
你把入口球阀摘下来,阀芯用异丙醇超声洗净后换上试试,结构比较复杂,拆开注意

purge时报警会是什么原因呢

发自小木虫IOS客户端
选择比毅力更重要
6楼2015-12-14 22:40:45
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学术巨星

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by txyu at 2015-12-14 22:30:57
应该不是灯的问题,现在purge时压力都会警报
...

首先,明确一点:你图上基线规律波动的信号是DAD的信号,并不是压力的信号。
其次,如你所说,出现基线信号的波动后,你才怀疑柱头或管路污染  用异丙醇冲洗,或者purge,采取相应措施后并基线波动并没有解决。
所以,并不是压力导致你信号的波动,而是压力波动以后,你清洗不当,导致的压力报警。不要把原因和结果弄反了!
再次,异丙醇粘度大,不管任何管路,通常是不建议用100%异丙醇冲洗的。
针对purge时压力报警,是因为泵的单向阀内有污染或残余堵塞,把出口、入口单向阀卸下来,先用有机溶剂超生清洗除异丙醇等有机污染物、再用50%有机溶剂超生清洗,最后用纯水超生清洗。
7楼2015-12-15 08:29:21
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txyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 学术巨星 at 2015-12-15 08:39:07
我仍然保留原来的建议:
查看一下紫外灯的强度和累计使用时间,
初步怀疑是紫外灯到寿命了,该更换了。...

O(∩_∩)O谢谢,请问该怎么查看紫外灯强度,安捷伦1200
选择比毅力更重要
9楼2015-12-15 09:56:43
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学术巨星

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by txyu at 2015-12-15 09:56:43
O(∩_∩)O谢谢,请问该怎么查看紫外灯强度,安捷伦1200...

我没用过这个仪器,你还是问你学校用过的人,或者打电话给客服吧。
10楼2015-12-15 10:16:46
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