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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 用于rna提取的动物样本怎么保存
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qian0717

新虫 (小有名气)

[求助] 用于rna提取的动物样本怎么保存 已有2人参与

我提的是虫子的Rna,虫子很小，大概2mm长，0.5mm宽。每个样本30只，大概2mg。
参考了相关文献的保存方法，液氮速冻再放-80。具体操作是：取样时，我把虫子放到EP管里，再把EP管插到浮板上，再把浮板放到液氮里，2分钟后转移到—80度冰箱保存。

提rna时，同时提了新鲜的样本和冻存的样本，跑胶发现冻存样本rna的条带有些拖尾，这说明rna有降解？是保存的方法不对吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-12-05 19:08:21
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lsl635600374

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by qian0717 at 2015-12-09 18:45:00
请帮我看看电泳图吧，不太懂。RNA是否降解了，条带周围的弥散是怎么回事？
我用的是1.2%的胶，1XTAE，160v，10min。点了DNAmarker,100, 250, 500, 750, 1000, 2000bp,最亮带750bp。

第一张图是提完之后立即跑的 ...

第一张图能看出5S，上样量是挺多的，第一二张看出28S弥散，应该是降解了，第三张图放置过夜确实是降解了
还有，你电泳条件160V太高了吧，我一般120V 20-25min
另外，RNA完整性检测时没必要加DNA Marker
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我们用多一点点的辛苦，来交换多一点点的幸福。
9楼2015-12-10 18:02:36
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lsl635600374

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我提虫子RNA一般都提的时候直接加trizol研磨的
你提的RNA三条带亮度怎么样呢
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我们用多一点点的辛苦，来交换多一点点的幸福。
2楼2015-12-05 21:38:02
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KOP利

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
RNA类实验正确的样本采集及保存方法，如下可供你参考：取新鲜组织（注：生物体死亡后10分钟内取材料并保存好），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，每50~100 mg组织加1 ml Trizol溶液匀浆裂解组织样品，操作最好在冰上进行。匀浆的裂解液4℃短期保存（1个月），-20度或- 70℃长期保存。
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YNWA！
3楼2015-12-07 10:32:10
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qian0717

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lsl635600374 at 2015-12-05 21:38:02
我提虫子RNA一般都提的时候直接加trizol研磨的
你提的RNA三条带亮度怎么样呢


您好
我是用天根的离心柱型试剂盒提的
没有5s，28s约是18s的2倍
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4楼2015-12-09 12:02:19
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