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EMSA电泳的问题
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eagle00768
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EMSA电泳的问题
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如图,为何自由探针总是不在一个水平线?跑了好多次了,总是这个结果,不知道是什么原因造成的。另:非变性胶用什么蛋白marker比较好?求推荐!
图片1.png
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2015-12-05 13:21:37
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木桃夹子
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【答案】应助回帖
我之前也存在这样的问题,应该就是胶凝固的不均匀的问题,加入APS前要超声10min,然后我是放在温水中迅速加入制胶板应该好一点
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7楼
2021-12-13 23:00:52
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刘芬玲
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2015-12-08 20:11:01
会不会是胶的问题,还有电泳时的电压??
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2楼
2015-12-08 14:43:21
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eagle00768
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2楼
:
Originally posted by
刘芬玲
at 2015-12-08 14:43:21
会不会是胶的问题,还有电泳时的电压??
谢谢这位同学的意见!嗯,有考虑过这个问题,期间有用过含甘油和不含甘油的6%非变性胶,都出现了这种情况。楼主一直用100V预电泳一个小时左右然后用100V跑1个半小时左右,不知道是不是电压太大,打算下次实验调整下电压。
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3楼
2015-12-08 14:55:31
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询问一下楼主,你在蛋白和核酸孵育好以后,是直接上样的还是固定处理以后在上样的?
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4楼
2015-12-08 15:55:22
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