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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » 碱性蛋白怎么做EMSA？
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schi

木虫 (小有名气)

schi

[求助] 碱性蛋白怎么做EMSA？ 已有2人参与

各位大神好，我现在一直在用荧光染色的方法做EMSA的实验，SYBR GREEN染DNA，SYPRO RUBY染蛋白质，
现在实验有很多困惑请大家指点：
1. 怎么样保证碱性蛋白和DNA在native 胶中都向同一个方向泳动（DNA带负点，而碱性蛋白（PI 8左右），在电泳buffer PH 6.8中是带正点的）？
2. DNA 在native中为什么和DNA marker的大小不匹配（差异很大），而且500bp的片段和50bp的片段在同一个位置上？
这是最主要的困惑，其他的问题还有好多，请大神指点啊。
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1楼 2014-07-24 23:22:55
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wangtao89hf

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

能不能考虑延长DNA的长度，使得DNA带的电荷远远大于蛋白质，我也在做这个我的PI=11.56，我是打算这么尝试尝试
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2楼2015-01-05 22:13:06
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小天啊小天

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好，你现在解决这个问题了吗
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3楼2018-01-16 14:31:19
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小天啊小天

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangtao89hf at 2015-01-05 22:13:06
能不能考虑延长DNA的长度，使得DNA带的电荷远远大于蛋白质，我也在做这个我的PI=11.56，我是打算这么尝试尝试

您延长DNA长度的方法，成功了吗
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4楼2018-01-16 14:46:46
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