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汕头大学海洋科学接受调剂
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schi

木虫 (小有名气)

schi

[求助] 碱性蛋白怎么做EMSA? 已有2人参与

各位大神好,我现在一直在用荧光染色的方法做EMSA的实验,SYBR GREEN染DNA,SYPRO RUBY染蛋白质,
现在实验有很多困惑请大家指点:
1. 怎么样保证碱性蛋白和DNA在native 胶中都向同一个方向泳动(DNA带负点,而碱性蛋白(PI 8左右),在电泳buffer PH 6.8中是带正点的)?
2. DNA 在native中为什么和DNA marker的大小不匹配(差异很大),而且500bp的片段和50bp的片段在同一个位置上?
这是最主要的困惑,其他的问题还有好多,请大神指点啊。
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wangtao89hf

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

能不能考虑延长DNA的长度,使得DNA带的电荷远远大于蛋白质,我也在做这个我的PI=11.56,我是打算这么尝试尝试
2楼2015-01-05 22:13:06
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小天啊小天

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好,你现在解决这个问题了吗
3楼2018-01-16 14:31:19
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小天啊小天

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangtao89hf at 2015-01-05 22:13:06
能不能考虑延长DNA的长度,使得DNA带的电荷远远大于蛋白质,我也在做这个我的PI=11.56,我是打算这么尝试尝试

您延长DNA长度的方法,成功了吗
4楼2018-01-16 14:46:46
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