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eagle00768

木虫 (小有名气)

[求助] EMSA电泳的问题 已有3人参与

如图,为何自由探针总是不在一个水平线?跑了好多次了,总是这个结果,不知道是什么原因造成的。另:非变性胶用什么蛋白marker比较好?求推荐!

EMSA电泳的问题
图片1.png
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eagle00768

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 陈爱中 at 2015-12-08 15:55:22
询问一下楼主,你在蛋白和核酸孵育好以后,是直接上样的还是固定处理以后在上样的?

按照说明书说明加了试剂盒提供的loading buffer以后用枪头混匀然后上样的。不知道您指的固定是?

发自小木虫IOS客户端
5楼2015-12-08 18:29:50
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查看全部 7 个回答

刘芬玲

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


eagle00768: 金币+1, 有帮助 2015-12-08 20:11:01
会不会是胶的问题,还有电泳时的电压??
2楼2015-12-08 14:43:21
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eagle00768

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 刘芬玲 at 2015-12-08 14:43:21
会不会是胶的问题,还有电泳时的电压??

谢谢这位同学的意见!嗯,有考虑过这个问题,期间有用过含甘油和不含甘油的6%非变性胶,都出现了这种情况。楼主一直用100V预电泳一个小时左右然后用100V跑1个半小时左右,不知道是不是电压太大,打算下次实验调整下电压。

发自小木虫IOS客户端
3楼2015-12-08 14:55:31
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陈爱中

新虫 (小有名气)

询问一下楼主,你在蛋白和核酸孵育好以后,是直接上样的还是固定处理以后在上样的?
4楼2015-12-08 15:55:22
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