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PCR失败求助已有4人参与
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大家好，我最近开始接触PCR，但是遇到一些问题，求大家指教。 我在公司定了一个质粒，上边有我的目的基因片段（3350 bp），我自己设计了引物，PCR之后，在电泳中发现了两条带，其中一个是正常大小，因此就把胶切下来，用试剂盒提取其中的DNA，然后跑胶，也得到了正确的条带。当我在用这纯化后的DNA，做模板，用相同的试剂和条件，再次PCR，为了得到更多的产物，发现PCR上边只有小于200 bp的条带。求这种第二次PCR有什么讲究，或者没成功有什么地方需要改正的吗？ |
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