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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】关于HPLC单糖出峰重叠问题
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hjp837212942

新虫 (小有名气)

[求助] 【求助】关于HPLC单糖出峰重叠问题 已有3人参与

急！！！！实验过程中需要检测反应液中的各种单糖，包括葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖。目前检测方法为示差检测器，有机酸柱，流动相是5mM硫酸，柱温60℃，流速0.6ml/min。在该检测条件下，各单糖的峰不能有效的分开。求有相关经验的大神指点，非常感激。
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做自己
1楼 2015-10-13 21:56:46
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hjp837212942

新虫 (小有名气)
自顶
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做自己
2楼2015-10-13 21:57:00
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hjp837212942

新虫 (小有名气)
up
3楼2015-10-13 21:57:07
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viviansue

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
什么是有机酸柱
我知道有专门分离糖的柱子 使用硅胶钙填充的 你可以问一下销售 美国这边叫SUGAR 柱
我觉得流速可以再减低一点 0.2-0.3ml/min
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来自大洋彼岸小药分一枚
4楼2015-10-13 23:14:18
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hjp837212942

新虫 (小有名气)
顶顶顶，急急急
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做自己
5楼2015-10-27 16:33:43
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

你是不是sepax的氢柱 分不开的 至少果糖和葡萄糖肯定分不开 要用钙柱才行
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6楼2015-10-27 17:56:42
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月夏月影06

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我用的thermo HyperREZ XP Organic Acids进行分离，目前检测方法为示差检测器，流动相是水，柱温从30-80℃也尝试过了，感觉没什么影响，流速0.4ml/min。
葡萄糖果糖只能区分但是达不到基线分离，蔗糖和麦芽糖完全分不开/(ㄒoㄒ)/~~
你跟我的条件是不是差不多？
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7楼2015-12-16 10:17:00
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月夏月影06

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by lifucheng at 2015-10-27 17:56:42
你是不是sepax的氢柱 分不开的 至少果糖和葡萄糖肯定分不开 要用钙柱才行

我用的thermo HyperREZ XP Organic Acids进行分离，有什么方法能让单糖之间基线分离呢？流动相我看到说明书上写的是0.005M硫酸，我试过酸性条件，也试过纯水，感觉没什么差别。
基线分离与检测器有关吗？还是说我主要应该更换色谱柱，调整流动相？
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8楼2015-12-16 10:35:09
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月夏月影06

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by lifucheng at 2015-10-27 17:56:42
你是不是sepax的氢柱 分不开的 至少果糖和葡萄糖肯定分不开 要用钙柱才行

我用的thermo HyperREZ XP Organic Acids进行分离，目前检测方法为示差检测器，流动相是水，柱温从30-80℃也尝试过了，感觉没什么影响，流速0.4ml/min。
葡萄糖果糖只能区分但是达不到基线分离，蔗糖和麦芽糖完全分不开。
请问如果更换蒸发光检测器会有更好的效果吗？
流动相根据说明书只调整到0.005M硫酸，发现也没有什么影响，我该怎么作调整呢？
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9楼2015-12-16 10:37:36
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 月夏月影06 at 2015-12-16 10:35:09
我用的thermo HyperREZ XP Organic Acids进行分离，有什么方法能让单糖之间基线分离呢？流动相我看到说明书上写的是0.005M硫酸，我试过酸性条件，也试过纯水，感觉没什么差别。
基线分离与检测器有关吗？还是说我 ...

Organic Acids柱多半分不开 最好有在这款柱子填料上修饰了Ca或Pb的可能会好些
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10楼2015-12-16 12:05:19
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