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heroyan

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】关于hplc,各位兄弟救命啊~~~已有12人参与

最近在摸一个化合物的hplc条件,用c18柱,已经可以肯定该化合物极性很小,可是我试遍了所有能用的流动相,出峰时间都回合溶剂峰重合。水相提到99%也不能把出峰时间推后。自己初步想了一下可能有一下原因:
1、化合物(对照品)于柱子出现不可逆结合,前面所出的峰为杂质峰(但是对照品是打过核磁的,纯度应该不成问题)

2、化合物可能在流动相中有解离,使得极性增大,使药物于柱子无保留,出峰时间大幅度提前。(对于这一点,我不知道怎么确定药物到底是不是有解离,那位大哥知道的话,告诉我一下方法)

还有什么其他原因,请各位大哥不吝赐教,唉,摸了一个月了~~~

[ Last edited by heroyan on 2011-3-22 at 13:25 ]
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

如果调流动相极性,pH等不行,可能要换色谱柱
守候在风中的宁静。
2楼2011-03-22 13:39:03
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梁丰

银虫 (初入文坛)


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换成极性比较大的色谱柱试试
3楼2011-03-22 16:13:02
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lj420

银虫 (小有名气)

换成正向色谱试一试
4楼2011-03-28 21:30:43
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qiyushzu

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要不在流动相中加点东西,要么改变待分离物的解离特性,或者改变PH
5楼2011-03-28 23:07:17
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solocheng

荣誉版主 (文坛精英)

黑洞洞主

优秀版主

用HILIC 柱试试吧
你来了,我信你不会走;你走了,我当你没来过。
6楼2011-03-29 01:40:10
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souron

至尊木虫 (知名作家)


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你的东西到底出来没有?

如果死时间出来,那就是化合物极性太强了

不建议用反相,而应该用亲水作用色谱,就是ls说的HILIC

lz不妨把死时间的峰接出来用质谱鉴定一下

看是不是你的东西

如果没出来,那再想办法
7楼2011-03-29 08:25:35
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小醇醇

木虫 (正式写手)

攀登者~

为啥不用正相柱试一下
即使是走过无数次的路,也能走到从未踏足过的地方;正因为是走过无数次的路,景色才会变幻万千
8楼2011-03-29 08:26:58
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sdzktd

木虫 (正式写手)

美丽家族三当家

换柱子试下,正相柱或HILIC柱
belivemesuccess!!
9楼2011-03-29 11:47:29
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AZURESKY1999

至尊木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
换个色谱柱吧,另外流动相也要根据色谱柱的不同进行调整
10楼2011-03-29 12:55:54
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