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ningfan1989

铁虫 (初入文坛)

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[求助] 关于HPLC的应用

各位熟悉HPLC的虫友，本人刚刚接触高效液相，现在需要改变流动相条件等推迟目标峰的出峰时间，同时尽量将峰形分开，请给予相应指导，万分感谢！！
现在的流动相比例是甲醇：水=7:3

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1楼2012-05-04 10:38:12

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痴夷子皮

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
scelab: 金币+5, MicEPI+1, 谢谢热心交流~ :) 2012-05-04 17:46:06

推迟目标峰的出峰时间
1、增加水的比例，试试吧甲醇：水=7:3调整为5:5；
2、降低流速，如果现在流速是1.0，建议试试0.8，再低不要低于0.5；
3、降低柱温，推荐30℃，太低会拖尾；
4、调控流动相ph，ph对保留时间的影响因样品酸碱性而异，若样品中性，就算了。
改善峰型及分离度
1、柱温，柱温高，流动相粘度低，减少拖尾，建议柱温最高设置40℃；
2、流动相pH，如果要调控pH，可以考虑引入缓冲液，流动相保持一定的离子强度，改善峰型减少拖尾，并因样品杂质酸碱性不同而有效分离；
3、梯度，如果是使用二院泵体系，就算了，不能实现。如果可以走梯度，可以试试4:6~6:4