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ningfan1989

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于HPLC的应用

各位熟悉HPLC的虫友,本人刚刚接触高效液相,现在需要改变流动相条件等推迟目标峰的出峰时间,同时尽量将峰形分开,请给予相应指导,万分感谢!!
    现在的流动相比例是甲醇:水=7:3
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eric211

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-05-04 20:56:36
建议用梯度对你的样品进行分析,流速都1.0mL/min是可以的。梯度从10%,20%,30%,40%,50%,60%,70%甲醇,时间间隔就得看柱体积了。然后跟结果再采用等浓度进行分析。
respectissomethingyouhavetohaveinordertoget!
4楼2012-05-04 19:30:07
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danbomingyue

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, 欢迎常来微生物板块交流哦^_^ 2012-05-04 14:45:46
本帖内容被屏蔽

2楼2012-05-04 14:03:04
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
scelab: 金币+5, MicEPI+1, 谢谢热心交流~ :) 2012-05-04 17:46:06
推迟目标峰的出峰时间
1、增加水的比例,试试吧甲醇:水=7:3调整为5:5;
2、降低流速,如果现在流速是1.0,建议试试0.8,再低不要低于0.5;
3、降低柱温,推荐30℃,太低会拖尾;
4、调控流动相ph,ph对保留时间的影响因样品酸碱性而异,若样品中性,就算了。
改善峰型及分离度
1、柱温,柱温高,流动相粘度低,减少拖尾,建议柱温最高设置40℃;
2、流动相pH,如果要调控pH,可以考虑引入缓冲液,流动相保持一定的离子强度,改善峰型减少拖尾,并因样品杂质酸碱性不同而有效分离;
3、梯度,如果是使用二院泵体系,就算了,不能实现。如果可以走梯度,可以试试4:6~6:4
守候在风中的宁静。
3楼2012-05-04 16:47:29
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