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【求助】关于HPLC单糖出峰重叠问题
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查看: 2020 | 回复: 12
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hjp837212942
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专业: 生物化学
[
求助
]
【求助】关于HPLC单糖出峰重叠问题
已有3人参与
急!!!!实验过程中需要检测反应液中的各种单糖,包括葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖。目前检测方法为示差检测器,有机酸柱,流动相是5mM硫酸,柱温60℃,流速0.6ml/min。在该检测条件下,各单糖的峰不能有效的分开。求有相关经验的大神指点,非常感激。
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做自己
1楼
2015-10-13 21:56:46
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月夏月影06
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【答案】应助回帖
引用回帖:
6楼
:
Originally posted by
lifucheng
at 2015-10-27 17:56:42
你是不是sepax的氢柱 分不开的 至少果糖和葡萄糖肯定分不开 要用钙柱才行
我用的thermo HyperREZ XP Organic Acids进行分离,目前检测方法为示差检测器,流动相是水,柱温从30-80℃也尝试过了,感觉没什么影响,流速0.4ml/min。
葡萄糖果糖只能区分但是达不到基线分离,蔗糖和麦芽糖完全分不开。
请问如果更换蒸发光检测器会有更好的效果吗?
流动相根据说明书只调整到0.005M硫酸,发现也没有什么影响,我该怎么作调整呢?
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9楼
2015-12-16 10:37:36
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viviansue
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感谢参与,应助指数 +1
什么是有机酸柱
我知道有专门分离糖的柱子 使用硅胶钙填充的 你可以问一下销售 美国这边叫SUGAR 柱
我觉得流速可以再减低一点 0.2-0.3ml/min
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来自大洋彼岸小药分一枚
4楼
2015-10-13 23:14:18
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lifucheng
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分析
【答案】应助回帖
你是不是sepax的氢柱 分不开的 至少果糖和葡萄糖肯定分不开 要用钙柱才行
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6楼
2015-10-27 17:56:42
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月夏月影06
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专业: 食品科学基础
【答案】应助回帖
我用的thermo HyperREZ XP Organic Acids进行分离,目前检测方法为示差检测器,流动相是水,柱温从30-80℃也尝试过了,感觉没什么影响,流速0.4ml/min。
葡萄糖果糖只能区分但是达不到基线分离,蔗糖和麦芽糖完全分不开/(ㄒoㄒ)/~~
你跟我的条件是不是差不多?
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7楼
2015-12-16 10:17:00
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