应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求助！如何把线性双链DNA病毒基因组（36kb)和载体元件直接连起来
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1397  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

busen

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助！如何把线性双链DNA病毒基因组（36kb)和载体元件直接连起来 已有2人参与

因为要构建腺病毒载体，需要把腺病毒的全基因组和载体元件（复制原点、抗性基因等）直接连起来

已经尝试了通过同源重组的方法：构建包含载体元件以及重组同源臂的重组质粒（左右同源臂分别为1500bp,2500bp，图谱如下），共电转BJ5183感受态，没有筛到阳性克隆

尝试采用TAKARA INFUSION试剂盒，想通过一步重组法直接将载体元件和腺病毒末端连接起来，也筛不到阳性克隆

以上两种方法都重复了好些遍，不断改变载体的基因组的浓度和摩尔比，都无法得到目的克隆菌株，不知道出了什么问题，求大神解答

求助！如何把线性双链DNA病毒基因组（36kb)和载体元件直接连起来
腺病毒基因组图谱.JPG


求助！如何把线性双链DNA病毒基因组（36kb)和载体元件直接连起来-1
重组质粒图谱.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-10-12 08:49:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个片段太大了，回收和连接的效率都会很低的，建议找专业的公司帮你完成。。
赞一下 回复此楼
学习再学习，努力再努力。
2楼2015-10-26 15:25:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junjieshao

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
3楼2020-11-12 04:45:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengxueren

新虫 (正式写手)
无缝克隆，难搞。

发自小木虫Android客户端
回复此楼
4楼2021-02-18 00:34:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengxueren

新虫 (正式写手)
建议用酵母同源重组构建。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2021-02-18 00:35:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 busen 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-27 18:09 by AZMK
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 315调剂 +4 0860求调剂 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:23 by wangjy2002
[考研] 275求调剂 +10 Micky11223 2026-03-25 12/600 2026-03-27 09:41 by caszguilin
[考研] 342求调剂 +3 加油a李zs 2026-03-26 3/150 2026-03-27 00:29 by wxiongid
[考研] 求调剂 +5 芦lty 2026-03-25 6/300 2026-03-26 20:49 by 不吃魚的貓
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 8/400 2026-03-26 20:34 by Higraduate
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338 +4 YYYYYNNNNN 2026-03-26 4/200 2026-03-26 19:00 by macy2011
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭