24小时热门版块排行榜    

查看: 1525  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

busen

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助!如何把线性双链DNA病毒基因组(36kb)和载体元件直接连起来 已有2人参与

因为要构建腺病毒载体,需要把腺病毒的全基因组和载体元件(复制原点、抗性基因等)直接连起来

已经尝试了通过同源重组的方法:构建包含载体元件以及重组同源臂的重组质粒(左右同源臂分别为1500bp,2500bp,图谱如下),共电转BJ5183感受态,没有筛到阳性克隆

尝试采用TAKARA INFUSION试剂盒,想通过一步重组法直接将载体元件和腺病毒末端连接起来,也筛不到阳性克隆

以上两种方法都重复了好些遍,不断改变载体的基因组的浓度和摩尔比,都无法得到目的克隆菌株,不知道出了什么问题,求大神解答

求助!如何把线性双链DNA病毒基因组(36kb)和载体元件直接连起来
腺病毒基因组图谱.JPG


求助!如何把线性双链DNA病毒基因组(36kb)和载体元件直接连起来-1
重组质粒图谱.JPG
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junjieshao

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2020-11-12 04:45:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个片段太大了,回收和连接的效率都会很低的,建议找专业的公司帮你完成。。
学习再学习,努力再努力。
2楼2015-10-26 15:25:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengxueren

新虫 (正式写手)

4楼2021-02-18 00:34:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengxueren

新虫 (正式写手)

建议用酵母同源重组构建。

发自小木虫Android客户端
5楼2021-02-18 00:35:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
信息提示
请填处理意见