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求助！如何把线性双链DNA病毒基因组（36kb)和载体元件直接连起来 已有2人参与
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因为要构建腺病毒载体，需要把腺病毒的全基因组和载体元件 （复制原点、抗性基因等）直接连起来已经尝试了通过同源重组 的方法：构建包含载体元件以及重组同源臂的重组质粒（左右同源臂分别为1500bp,2500bp，图谱如下），共电转BJ5183感受态，没有筛到阳性克隆尝试采用TAKARA INFUSION 试剂盒，想通过一步重组法直接将载体元件和腺病毒末端连接起来，也筛不到阳性克隆以上两种方法都重复了好些遍，不断改变载体的基因组的浓度和摩尔比，都无法得到目的克隆菌株，不知道出了什么问题，求大神解答  腺病毒基因组图谱.JPG  重组质粒图谱.JPG |
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junjieshao
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fengxueren
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5楼2021-02-18 00:35:13
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