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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 电泳图都是一片白，没有条带
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董小露

金虫 (小有名气)

小牛

[求助] 电泳图都是一片白，没有条带 已有4人参与

这是我今天跑的电泳图，为什么什么都没有，都是一大片白，求高手指点！！
我前两天用同样的模板，同样的引物，同样的条件跑出来过想要的条带，想重复一次，可是这次却什么都没有，不知道怎么回事，急求大家帮助！！
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1楼 2015-10-11 14:51:16
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足下客

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 董小露 at 2015-10-12 18:02:10
我这次换缓冲液了，可是还是那样。。。我的模板是4度保存的，以前也是这么放着的，没有出现过这种问题，还有哪里可能出问题了么...

你以前跑出来过的条带可以上图看一下吗？还有你的PCR体系的配置和PCR的反应条件？还有你的目的片段是多大？仔细看了一下你跑的电泳，样本孔的泳带是有条带的，只是不明显（因为背景太亮了，不好分辨），你的模板用的是什么？感觉你PCR的反应条件应该不是很成熟，有非特异性扩增
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27楼2015-10-19 16:08:09
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足下客

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-12 13:42:14
董小露: 金币+15, ★★★很有帮助 2015-10-12 18:13:55
把电泳槽中的缓冲液换掉，用新配的缓冲液，胶也重配，EB加得太多了，不需要加那么多。你以前扩出来的条带有没有测序过？确定是你要的序列吗？模板是保存在哪里的？
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2楼2015-10-12 10:32:53
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董小露

金虫 (小有名气)

小牛
引用回帖:
2楼: Originally posted by 足下客 at 2015-10-12 10:32:53
把电泳槽中的缓冲液换掉，用新配的缓冲液，胶也重配，EB加得太多了，不需要加那么多。你以前扩出来的条带有没有测序过？确定是你要的序列吗？模板是保存在哪里的？

我是放在EB里泡了半个小时的，你是觉得太亮么，我用正常光觉得不清楚，所以用的弱光照的，可能就太亮了，条带的位置大概就是我想要的那个位置，主要是现在连条带都没有，那我要不换换缓冲液试一下
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3楼2015-10-12 10:39:14
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董小露

金虫 (小有名气)

小牛
引用回帖:
2楼: Originally posted by 足下客 at 2015-10-12 10:32:53
把电泳槽中的缓冲液换掉，用新配的缓冲液，胶也重配，EB加得太多了，不需要加那么多。你以前扩出来的条带有没有测序过？确定是你要的序列吗？模板是保存在哪里的？

可是如果是缓冲液的问题，那maker跑的挺好的呀，没有出问题，是不是我扩增的时候出什么问题了
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4楼2015-10-12 10:40:36
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