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changmaster

新虫 (小有名气)

[求助] 高通量测序后分析相关已有4人参与

在诺禾做的转录组测序,总共4个样,一个对照,3个不同时间的处理样。对材料进行3h,6h,9h的胁迫处理,获得的3个处理样。看文献好像大多数学者都把不同时间的处理样进行混合,然后测序,最后只需要分析处理样跟对照两个进行比较。我当初测序的时候不懂,听了公司销售人员的话(多测钱多),没有混合,导致现在不知道该怎么分析。请问有没有哪位大侠可以给点建议的,感激不尽!
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yuanuancao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-10-19 22:58:41
可以分别分析对照与3个处理样的差异基因,以及对照与3个处理样共有的差异基因

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2楼2015-10-10 08:49:40
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ahnuzc

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-10-19 22:58:54
你把所有处理组混合了,那分时间点还有什么意义?比较肯定是两两比较,如楼上所说你可以把每个时间点的处理都和对照比,这样会产生三组差异表达基因,代表的是不同时间处理的差异。你可以从这三组差异表达基因里面找出重叠的基因,应该是比较commn的对胁迫响应的基因,其他不重叠的就是时间点特异的了,这里应该有很多可以做的

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6楼2015-10-11 11:57:04
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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-10-19 22:59:14
这其实是测序公司没有跟你说清楚,或者想让你多测几个样。一般来说,测序分析就是两组进行比对。你的时间点本是预实验该做的事情,通过预实验,找到最合适的一个时间点,然后做测序,分析。

既然已经测了,说责备谁的话也没用。建议你分析一下3个时间点的数据与对照组的差异,选择差异最大的一个进行详细分析。如此即可!
如果还有什么不懂,欢迎私信。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

我就是我IamwhatIam
8楼2015-10-17 23:42:03
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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

引用回帖:
9楼: Originally posted by changmaster at 2015-10-19 07:00:49
说的太对了,就是最开始测的时候,自己不懂,公司销售让测4个样,现在发现,纯属想多赚钱,坑我。就按大侠说的,分析看,感谢!
...

不客气。有什么问题,可以再问
我就是我IamwhatIam
10楼2015-10-19 09:56:45
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普通回帖

英子~

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by yuanuancao at 2015-10-10 08:49:40
可以分别分析对照与3个处理样的差异基因,以及对照与3个处理样共有的差异基因

愿闻其详!我也是跟楼上共同的问题。具体操作是什么呢?有相关指导书么?
3楼2015-10-10 12:45:05
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changmaster

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuanuancao at 2015-10-10 08:49:40
可以分别分析对照与3个处理样的差异基因,以及对照与3个处理样共有的差异基因

看了很多文献,大多转录组高通量分析,最后都是对照跟处理组两个相比,然后分析下差异,我这个处理组相当于有3个,最后在论文里不知道该怎么呈现呢  大侠,你有做过相关方面的吗 感谢感谢
做自己,不试图成为任何人
4楼2015-10-10 16:53:50
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changmaster

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 英子~ at 2015-10-10 12:45:05
愿闻其详!我也是跟楼上共同的问题。具体操作是什么呢?有相关指导书么?...

你也是做转录组的吗,说说你的情况呗,可以共同学习
做自己,不试图成为任何人
5楼2015-10-10 16:55:32
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changmaster

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by ahnuzc at 2015-10-11 11:57:04
你把所有处理组混合了,那分时间点还有什么意义?比较肯定是两两比较,如楼上所说你可以把每个时间点的处理都和对照比,这样会产生三组差异表达基因,代表的是不同时间处理的差异。你可以从这三组差异表达基因里面找 ...

很有帮助!非常感谢

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7楼2015-10-12 08:52:46
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changmaster

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 幽幽深谷竹 at 2015-10-17 23:42:03
这其实是测序公司没有跟你说清楚,或者想让你多测几个样。一般来说,测序分析就是两组进行比对。你的时间点本是预实验该做的事情,通过预实验,找到最合适的一个时间点,然后做测序,分析。

既然已经测了,说责备 ...

说的太对了,就是最开始测的时候,自己不懂,公司销售让测4个样,现在发现,纯属想多赚钱,坑我。就按大侠说的,分析看,感谢!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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9楼2015-10-19 07:00:49
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