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自然茶

新虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌转化实验 已有9人参与

大家好,我昨天下午做的基因转化实验,即链接完,紧接着着转化,然会过夜培养,但是今天并没看到菌落,转化失败了?不知道什么原因 ,求大家给建议,谢谢
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-27 23:06:10
如果没看到菌落只能重新做了,就像楼上说的载体抗性是否与你转化所用的平板抗性一致;感受态最好是用最新制备好的;在做转化时,增加几个对照,即1,只有酶切后的载体,判断是否载体的酶切效果;2,正常的空载体,判断感受态的活性
医学&统计学
4楼2015-09-26 13:57:38
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普通回帖

海里的淡水鱼

禁虫 (小有名气)

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-27 23:05:37
本帖内容被屏蔽

2楼2015-09-26 09:24:44
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自然茶

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 海里的淡水鱼 at 2015-09-26 09:24:44
是否连上载体 载体抗性是否正确 感受态是不是有问题 仔细检查一下

连没连上,怎么检查啊?载体抗性是感受态细胞的抗性吗?
谢谢
3楼2015-09-26 11:18:01
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海里的淡水鱼

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

5楼2015-09-26 22:58:54
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海里的淡水鱼

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

6楼2015-09-26 23:00:43
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白话八股

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-27 23:06:44
排除载体问题,没长的话应该是目的片段没有连上去
最爱的那个人会出现在身边。
7楼2015-09-27 10:30:46
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evil丶zero

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-27 23:07:29
这个没有看你具体怎么做也不肯定是哪里出问题了,你要做对照,用空载转化做对照。有可能是感受态失活了。更大可能是连接不成功。
8楼2015-09-27 17:02:05
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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信息太少,没法判断,做好对照有利于找原因

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
9楼2015-09-27 17:30:51
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MMCCBB

新虫 (著名写手)

也有可能是你的菌液OD太低,可以下次离心再涂板。

发自小木虫Android客户端
10楼2015-09-27 22:42:55
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