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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 大肠杆菌转化实验
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tuzkileon

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你实验操作细节描述的不清楚，大家没办法帮你分析，理论上大肠杆菌是长的非常快的
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11楼2015-09-28 21:39:11
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品茗听雨0530

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同时做个阳性对照！！！
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12楼2015-09-28 22:00:44
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glssg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没链接上的可能性较大，说一下你的片段大小，片段浓度，以及连接体系，什么连接酶，链接了多久，越详细越好，让大家帮你分析分析。

发自小木虫Android客户端
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不安于现在而又安于现在
13楼2015-09-29 07:38:20
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自然茶

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-09-27 17:30:51
信息太少，没法判断，做好对照有利于找原因

做对照了，还是没有菌。跟前几天一样，平板上出现了连在一起的几个气泡。还有42℃，90s后，有2-3min 冰浴，我没冰浴，
LB 培养基摇床培养涂平板，吸取100UL ,这一步，吸取时没有摇匀离心管，直接洗去了 ，我好想也看到了离心管底部有浑浊的沉淀啊？这些是问题吗？
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14楼2015-09-29 10:50:37
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自然茶

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by tuzkileon at 2015-09-28 21:39:11
你实验操作细节描述的不清楚，大家没办法帮你分析，理论上大肠杆菌是长的非常快的

刚开始做，有些我还不大懂，也不知道该怎么问。首先先谢谢大家，我现在也有反思实验的过程

发自小木虫IOS客户端
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15楼2015-09-29 11:00:51
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condy

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

原因太多了：载体酶切后需要跑胶检测，链接时间不能太短，抗性平板的抗性不能搞错了，链接体系正确吗？可以调整载体和目的DNA的比例。
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16楼2015-09-30 16:14:21
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