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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 大肠杆菌转化实验
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自然茶

新虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌转化实验 已有9人参与

大家好，我昨天下午做的基因转化实验，即链接完，紧接着着转化，然会过夜培养，但是今天并没看到菌落，转化失败了？不知道什么原因 ，求大家给建议，谢谢
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1楼 2015-09-26 09:21:02
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-27 23:06:10
如果没看到菌落只能重新做了，就像楼上说的载体抗性是否与你转化所用的平板抗性一致；感受态最好是用最新制备好的；在做转化时，增加几个对照，即1，只有酶切后的载体，判断是否载体的酶切效果；2，正常的空载体，判断感受态的活性
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医学&统计学
4楼2015-09-26 13:57:38
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普通回帖

海里的淡水鱼

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-27 23:05:37
本帖内容被屏蔽
2楼2015-09-26 09:24:44
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自然茶

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 海里的淡水鱼 at 2015-09-26 09:24:44
是否连上载体 载体抗性是否正确 感受态是不是有问题 仔细检查一下

连没连上，怎么检查啊？载体抗性是感受态细胞的抗性吗？
谢谢
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3楼2015-09-26 11:18:01
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海里的淡水鱼

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
5楼2015-09-26 22:58:54
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海里的淡水鱼

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2015-09-26 23:00:43
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白话八股

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-27 23:06:44
排除载体问题，没长的话应该是目的片段没有连上去
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最爱的那个人会出现在身边。
7楼2015-09-27 10:30:46
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evil丶zero

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-27 23:07:29
这个没有看你具体怎么做也不肯定是哪里出问题了，你要做对照，用空载转化做对照。有可能是感受态失活了。更大可能是连接不成功。
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8楼2015-09-27 17:02:05
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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信息太少，没法判断，做好对照有利于找原因

[ 发自小木虫客户端 ]
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天道酬勤
9楼2015-09-27 17:30:51
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MMCCBB

新虫 (著名写手)
也有可能是你的菌液OD太低，可以下次离心再涂板。

发自小木虫Android客户端
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10楼2015-09-27 22:42:55
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