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andywang6137木虫 (著名写手)
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[求助]
最近TA克隆老是失败，请大家分析一下。已有9人参与
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PCR产物，胶回收后TA克隆，板子总长成这样，请高手分析一下原因。taq酶，宝生物的；胶回收试剂盒，全式金的；T载体，用过生工和全式金的。感受态细胞，全式金和自己制备的。之前还做出来了，上学的时候TA克隆也没出过问题，现在涂的板子老是长成下面图片这样。我自己动手做了一次，2个研究生做了一次都是下面的结果（图1：准备回收的目的片段；图2-4，平板菌液，学生发过来的，忘记那一个是水做的对照）。分析不出来原因，请高手分析一下。谢谢！ 0.jpg  1.jpg  2.jpg  3.jpg |
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【答案】应助回帖
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按你说的情况，加水也出现上述情况，那么就只有两种原因了，就是我说的第二三两种，按你所说感受态出问题的可能性不大，那么就是抗生素的问题了，你可以挑取五到十个菌斑，用M13通用引物进行PCR验证，如果绝大部分有产物，说明抗生素没问题，如果大部分无产物，抗生素失效，不过前提是感受态没问题，最好换换抗生素吧 发自小木虫Android客户端 |
10楼2015-09-27 22:28:06
chenli1017
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2楼2015-09-25 18:33:37
songjie851
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3楼2015-09-25 20:00:12
cosmoslight
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4楼2015-09-25 20:08:16