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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » buffer对限制酶的影响
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Tama二等兵

新虫 (初入文坛)

[求助] buffer对限制酶的影响 已有2人参与

rt，可以用ste buffer 酶切么？
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1楼 2015-09-19 16:13:31
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Tama二等兵

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by coofir at 2015-09-21 20:08:36
不用推荐的buffer还可能使酶有星号活性。

明白了,请问您有没有试过双酶切后灭活,直接来做体外同源重组的?每天回收载体确实很烦
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5楼2015-09-21 20:33:19
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evangelina

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Tama二等兵: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-09-21 20:33:32
主要看盐浓度和pH。最好还是用回推荐的buffer去切，不然要不切不到，要不乱切一通。
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2楼2015-09-19 21:30:21
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coofir

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不用推荐的buffer还可能使酶有星号活性。
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3楼2015-09-21 20:08:36
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Tama二等兵

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by evangelina at 2015-09-19 21:30:21
主要看盐浓度和pH。最好还是用回推荐的buffer去切，不然要不切不到，要不乱切一通。

因为我想用双酶切后不回收,直接进行重组,不知道buffer对重组酶影响如何?又没时间进行这方面的验证,所以想问问有人试过不纯化直接重组的?
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4楼2015-09-21 20:29:33
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