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壳斗科锥属植物DNA提取，一开始提出来的有降解，之后不管用什么方法都提不出来 已有3人参与
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| 如题，用硅胶保存的叶片，之前用QIAGEN的试剂盒提出来过，现在用同样的试剂盒就提不出来了，糖的含量很高，过白色的柱子都离不下去，用CTAB-free冰浴十分钟抽提1-2次后，可以去掉大部分的糖，之后再按照QIAGEN的步骤提，很容易过柱子，但是跑胶什么都没有，测浓度显示10-20ng/ul，纯度也还好。用CTAB也试过，步骤如下：1mlCTAB-free（用的时候加了10ul巯基乙醇）冰浴十分钟，9000rad/min离心5min，去上清，加入1mlCTAB（用的时候加了10ul巯基乙醇），65度水浴45min，离心，酚氯仿异戊醇（25：24：1）抽提，离心取上清，氯仿异戊醇（24:1）抽提，取上清，加入1/10体积的NaAc，混匀，加入两倍体积的预冷无水乙醇，混匀，-20度存放两小时以上，1200rad/min 10min离心，75%乙醇清洗两次，干了之后加入100ulQIAGEN试剂盒的bufferAE和1ulRNA酶，65度水浴溶解后跑胶。如果不用CTAB-free抽提，沉淀DNA的时候会析出大量白色胶状沉淀，很像DNA，但是挑出清洗溶解后跑胶也是空白。材料用磨样仪磨和液氮磨都试过。 |
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Neo2000
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【答案】应助回帖
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试下成都福际的试剂盒，他们家的试剂盒不比进口的差 发自小木虫Android客户端 |
2楼2015-09-18 18:42:03
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3楼2015-09-29 16:41:31
4楼2015-10-05 11:26:52
jackyoung
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【答案】应助回帖
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-10 16:55:12
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后面的1200rad/min是打错了吧？12000？我建议你去cnki下载王军的木本植物DNA提取，另外，你跑胶的loading buffer有问题没？ 发自小木虫Android客户端 |
6楼2015-10-05 15:36:03
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7楼2015-10-08 12:57:07
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8楼2015-10-08 13:11:16
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