应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 壳斗科锥属植物DNA提取，一开始提出来的有降解，之后不管用什么方法都提不出来
51/1返回列表
查看: 2287  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

漠筱禾

金虫 (初入文坛)

[求助] 壳斗科锥属植物DNA提取，一开始提出来的有降解，之后不管用什么方法都提不出来 已有3人参与

如题，用硅胶保存的叶片，之前用QIAGEN的试剂盒提出来过，现在用同样的试剂盒就提不出来了，糖的含量很高，过白色的柱子都离不下去，用CTAB-free冰浴十分钟抽提1-2次后，可以去掉大部分的糖，之后再按照QIAGEN的步骤提，很容易过柱子，但是跑胶什么都没有，测浓度显示10-20ng/ul，纯度也还好。用CTAB也试过，步骤如下：1mlCTAB-free（用的时候加了10ul巯基乙醇）冰浴十分钟，9000rad/min离心5min，去上清，加入1mlCTAB（用的时候加了10ul巯基乙醇），65度水浴45min，离心，酚氯仿异戊醇（25：24：1）抽提，离心取上清，氯仿异戊醇（24:1）抽提，取上清，加入1/10体积的NaAc，混匀，加入两倍体积的预冷无水乙醇，混匀，-20度存放两小时以上，1200rad/min 10min离心，75%乙醇清洗两次，干了之后加入100ulQIAGEN试剂盒的bufferAE和1ulRNA酶，65度水浴溶解后跑胶。如果不用CTAB-free抽提，沉淀DNA的时候会析出大量白色胶状沉淀，很像DNA，但是挑出清洗溶解后跑胶也是空白。材料用磨样仪磨和液氮磨都试过。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-09-18 17:00:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

173734022

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2015-09-29 16:41:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-10 16:54:46
试下成都福际的试剂盒，他们家的试剂盒不比进口的差

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2015-09-18 18:42:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

漠筱禾

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 173734022 at 2015-09-29 16:41:31
我和你一样的 用乙醇沉淀时整个成乳白色!跑胶并没有什么！顺便问下楼主CTABfree是什么？

就是配CTAB缓冲液时不加CTAB，其他的都加
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-05 11:26:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackyoung

新虫 (正式写手)
9000 rad/min这rad/min是几个意思？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
CestLaVie
5楼2015-10-05 12:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-16 19:27 by rRvxEj3zorCy
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-16 18:00 by i3KBRD19ERkG
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-16 17:48 by i3KBRD19ERkG
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-16 17:03 by i3KBRD19ERkG
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-16 16:27 by i3KBRD19ERkG
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-16 08:27 by SjQobnC04j06
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-16 07:12 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:51 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:48 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:24 by LH5NkK5Ud4bh
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:11 by LH5NkK5Ud4bh
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:51 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:27 by LH5NkK5Ud4bh
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-16 05:03 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-16 04:51 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 02:23 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 申博发邮件 +4 Lmengk 2026-09-15 4/200 2026-09-16 00:05 by 木心想继续深造
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:14 by zNcEhTcH7ihq
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭