| 查看: 1891 | 回复: 16 | |||
[求助]
壳斗科锥属植物DNA提取，一开始提出来的有降解，之后不管用什么方法都提不出来 已有3人参与
|
| 如题，用硅胶保存的叶片，之前用QIAGEN的试剂盒提出来过，现在用同样的试剂盒就提不出来了，糖的含量很高，过白色的柱子都离不下去，用CTAB-free冰浴十分钟抽提1-2次后，可以去掉大部分的糖，之后再按照QIAGEN的步骤提，很容易过柱子，但是跑胶什么都没有，测浓度显示10-20ng/ul，纯度也还好。用CTAB也试过，步骤如下：1mlCTAB-free（用的时候加了10ul巯基乙醇）冰浴十分钟，9000rad/min离心5min，去上清，加入1mlCTAB（用的时候加了10ul巯基乙醇），65度水浴45min，离心，酚氯仿异戊醇（25：24：1）抽提，离心取上清，氯仿异戊醇（24:1）抽提，取上清，加入1/10体积的NaAc，混匀，加入两倍体积的预冷无水乙醇，混匀，-20度存放两小时以上，1200rad/min 10min离心，75%乙醇清洗两次，干了之后加入100ulQIAGEN试剂盒的bufferAE和1ulRNA酶，65度水浴溶解后跑胶。如果不用CTAB-free抽提，沉淀DNA的时候会析出大量白色胶状沉淀，很像DNA，但是挑出清洗溶解后跑胶也是空白。材料用磨样仪磨和液氮磨都试过。 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有189人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-10 16:54:46
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-10 16:54:46
|
试下成都福际的试剂盒，他们家的试剂盒不比进口的差 发自小木虫Android客户端 |
2楼2015-09-18 18:42:03
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2015-09-29 16:41:31
4楼2015-10-05 11:26:52
jackyoung
新虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 3507.7
- 散金: 60
- 红花: 23
- 帖子: 670
- 在线: 91.7小时
- 虫号: 799178
- 注册: 2009-06-26
- 性别: GG
- 专业: 园艺学与植物营养学
5楼2015-10-05 12:18:56
蜈蚣出门
铜虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 2304.1
- 散金: 380
- 红花: 2
- 帖子: 302
- 在线: 196.4小时
- 虫号: 3029921
- 注册: 2014-03-08
- 性别: GG
- 专业: 分子与进化生态学
【答案】应助回帖
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-10 16:55:12
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-10 16:55:12
|
后面的1200rad/min是打错了吧？12000？我建议你去cnki下载王军的木本植物DNA提取，另外，你跑胶的loading buffer有问题没？ 发自小木虫Android客户端 |
6楼2015-10-05 15:36:03
|
本帖内容被屏蔽 |
7楼2015-10-08 12:57:07
|
本帖内容被屏蔽 |
8楼2015-10-08 13:11:16
9楼2015-10-10 09:20:33
10楼2015-10-10 09:22:29
