| 查看: 2206 | 回复: 16 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
壳斗科锥属植物DNA提取，一开始提出来的有降解，之后不管用什么方法都提不出来 已有3人参与
|
||
| 如题，用硅胶保存的叶片，之前用QIAGEN的试剂盒提出来过，现在用同样的试剂盒就提不出来了，糖的含量很高，过白色的柱子都离不下去，用CTAB-free冰浴十分钟抽提1-2次后，可以去掉大部分的糖，之后再按照QIAGEN的步骤提，很容易过柱子，但是跑胶什么都没有，测浓度显示10-20ng/ul，纯度也还好。用CTAB也试过，步骤如下：1mlCTAB-free（用的时候加了10ul巯基乙醇）冰浴十分钟，9000rad/min离心5min，去上清，加入1mlCTAB（用的时候加了10ul巯基乙醇），65度水浴45min，离心，酚氯仿异戊醇（25：24：1）抽提，离心取上清，氯仿异戊醇（24:1）抽提，取上清，加入1/10体积的NaAc，混匀，加入两倍体积的预冷无水乙醇，混匀，-20度存放两小时以上，1200rad/min 10min离心，75%乙醇清洗两次，干了之后加入100ulQIAGEN试剂盒的bufferAE和1ulRNA酶，65度水浴溶解后跑胶。如果不用CTAB-free抽提，沉淀DNA的时候会析出大量白色胶状沉淀，很像DNA，但是挑出清洗溶解后跑胶也是空白。材料用磨样仪磨和液氮磨都试过。 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有154人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
4楼2015-10-05 11:26:52
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-10 16:54:46
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-10 16:54:46
|
试下成都福际的试剂盒，他们家的试剂盒不比进口的差 发自小木虫Android客户端 |
2楼2015-09-18 18:42:03
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2015-09-29 16:41:31
jackyoung
新虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 3507.7
- 散金: 60
- 红花: 23
- 帖子: 670
- 在线: 91.7小时
- 虫号: 799178
- 注册: 2009-06-26
- 性别: GG
- 专业: 园艺学与植物营养学
5楼2015-10-05 12:18:56
40