24小时热门版块排行榜    

查看: 1441  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

沙海林空

木虫 (正式写手)

[求助] 关于质粒提取遇到的问题 已有5人参与

我想用大肠杆菌来进行质粒的抽提,但我首先需要让质粒在大肠杆菌体内产生,
请问通常是用什么办法把原先的质粒导入到细菌体内?
生物小白,希望各位高手帮忙
谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

Die-Luft-der-Freiheit-weht.
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

兰兰园丁

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
沙海林空: 金币+15, ★★★很有帮助, 多谢 2015-09-17 19:19:11
引用回帖:
7楼: Originally posted by 沙海林空 at 2015-09-16 19:24:58
谢谢,我了解了一下,只需要直接将质粒加入到细菌培养液中就行。...

你说的这个是最常用用热激吧,这也不是单单的把质粒加到大肠杆菌里。是这样的,细胞先经处理成细胞壁松散的状态,即感受态细胞,加入质粒混匀后冰浴20分,质粒沉降到细胞表面,42度热激1分钟,细胞通透性增大,质粒进入细胞内,再冰浴2分钟,质粒就出不来啦!就进入细胞内,松弛型质粒的话就可以拷贝出多份啦!也还有其他很多方法可以导入质粒。

发自小木虫Android客户端
9楼2015-09-17 00:36:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

ksws0465326

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
沙海林空: 金币+5 2015-09-16 19:25:33
利用大肠杆菌感受态细胞,可以将质粒导入到其中,一般常用DH5α感受态,导入方法常用的有,电转,和化转,在网上应该可以搜到
2楼2015-09-16 10:12:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ASWDR

金虫 (小有名气)

比较简单的可以用钙离子溶液处理,制备感受态细胞,再转质粒进去

发自小木虫Android客户端
3楼2015-09-16 10:17:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syhzlsd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
沙海林空: 金币+5 2015-09-16 19:25:21
用感受态细胞直接转化质粒就可以了!
4楼2015-09-16 10:44:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 9/450 2026-08-21 15:38 by dcqxinyang
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
请填处理意见