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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 为什么western blot跑胶时，蛋白样品进入分离胶时，总是变弯，为什么？
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a15665819523

铜虫 (小有名气)

[求助] 为什么western blot跑胶时，蛋白样品进入分离胶时，总是变弯，为什么？ 已有8人参与

为什么western blot跑胶时，蛋白样品进入分离胶时，总是变弯，到了下面还会变的模糊，感觉像是指示剂跑散了的样子，为什么？求大神指教！
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要活得像毒品一样，要么惹不起，要么不能弃！
1楼 2015-09-12 20:00:06
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WDabc

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-17 22:33:43
变弯不应该，可能是内液漏了，上样的时候左右没有加loadingbuffer补齐。溴酚蓝散了没事，不影响

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-09-13 08:58:37
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阳光---阳光

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-17 22:34:23
会不会是浓缩胶和分离胶之间衔接不好？你做浓缩胶之前有没有把分离胶上面的水吸干？而且跑胶过程电压稳么？
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人的潜力是无限的！
3楼2015-09-13 09:56:06
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zhyurain

新虫 (初入文坛)

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可把电压调小一些。
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4楼2015-09-13 10:40:31
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zhyurain

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

还有一种可能是提取蛋白不纯含有杂质较多
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5楼2015-09-13 10:43:05
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kobe199613

木虫之王 (知名作家)

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★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-17 22:34:49
样品浓度偏高、甘油含量过高、另外可能是样品中有沉淀，可能出现条带弯曲。
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【招聘】医用高分子材料研发工程师（北京）
6楼2015-09-13 11:59:45
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果小胖子

铜虫 (初入文坛)

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★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-17 22:35:08
a15665819523: 金币+1 2015-11-07 17:09:31
浓缩胶和分离胶的浓度不一样且在两块儿胶中的电压是不一样的，可能原因是：1、胶浓度有问题2、电压的问题3、蛋白样品的上样量有问题4、一些个人操作的问题。建议一一排查，做好实验记录。正常情况下，在电压的不同的情况下会有一些弯度，似碗状，倒没啥事情。
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7楼2015-09-15 13:59:49
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zly19912002

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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a15665819523: 金币+1 2015-11-07 17:11:03
可能电压不稳，或者蛋白不纯，建议分部排查，祝好！
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随遇而安
8楼2015-09-15 19:18:01
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baleful

新虫 (初入文坛)

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★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-17 22:35:33
1、内液漏液会出现月牙形
2、浓缩胶和分离胶浓度差的大
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9楼2015-09-17 15:14:13
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zhqingfang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是配的凝胶混得不均匀，我也遇到过这种情况。
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实验忙碌中
10楼2015-09-17 16:02:57
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