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汕头大学海洋科学接受调剂
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薛虹妮

银虫 (小有名气)

[求助] western blot 转膜转成花的了 求问这是为什么 已有7人参与

蛋白胶跑完之后进行湿转,恒流250mA ,pvdf膜,两个半小时之后拿出来就成这鬼样子了有木有那位虫虫晓得原因啊,是不是因为气泡呢??

western blot 转膜转成花的了 求问这是为什么
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xipha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
薛虹妮: 金币+1, 有帮助 2014-09-16 00:14:22
看起来很像是一个大气泡, 你有给转膜系统降温么?
2楼2014-09-15 22:42:47
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薛虹妮

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xipha at 2014-09-15 22:42:47
看起来很像是一个大气泡, 你有给转膜系统降温么?

有啊,放在大只的冰盒里面做的,槽子里还放了冰袋~~就想说除了气泡之外还有没有别的可能造成这种结果的原因。问了好多人都不清楚。
3楼2014-09-16 00:14:13
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xipha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
薛虹妮: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-16 11:54:48
别的原因可以是转膜时胶没有放好(气泡), 电压/电流太高(过热气泡) , 转膜液没有加够(气泡), ...其它的一时想不起来. 言归正传, 再有就是你下次做的时候同时跑两块胶, 一块转膜一块考染, 然后你就能排除样品上可能的问题.
4楼2014-09-16 08:23:33
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薛虹妮

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xipha at 2014-09-16 08:23:33
别的原因可以是转膜时胶没有放好(气泡), 电压/电流太高(过热气泡) , 转膜液没有加够(气泡), ...其它的一时想不起来. 言归正传, 再有就是你下次做的时候同时跑两块胶, 一块转膜一块考染, 然后你就能排除样品上可能 ...

哇哇谢谢~~今天再来一发!!
5楼2014-09-16 11:55:05
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493260040

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
薛虹妮: 金币+1 2014-09-16 20:06:08
气泡的可能性很大

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2014-09-16 15:08:04
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉像是气泡,这个可能性比较大,先排除这个原因
7楼2014-09-16 15:23:36
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1012316516

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
薛虹妮: 金币+1 2014-09-16 20:06:15
膜要压实,有气泡是不行的,还要注意在冰盒中操作
8楼2014-09-16 15:28:17
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cavan

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


薛虹妮(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-19 16:28:53
三明治要夹紧,不能错位,气泡用玻璃棒擀走,还有要放冰袋,不然就会出现这样的情况。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
学无止境
9楼2014-09-19 11:07:42
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tsjxdr

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


薛虹妮(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-19 16:29:02
出了气泡之外 你的两块面包是不是干净的?而且温度控制哦,面包片不干净很不好
10楼2014-09-19 11:36:36
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