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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot 转膜转成花的了 求问这是为什么
汕头大学海洋科学接受调剂
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薛虹妮

银虫 (小有名气)

[求助] western blot 转膜转成花的了 求问这是为什么 已有7人参与

蛋白胶跑完之后进行湿转，恒流250mA ，pvdf膜，两个半小时之后拿出来就成这鬼样子了有木有那位虫虫晓得原因啊，是不是因为气泡呢？？

western blot 转膜转成花的了 求问这是为什么
IMG_20140915_211737.jpg
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1楼 2014-09-15 21:26:45
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xipha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
薛虹妮: 金币+1, ★有帮助 2014-09-16 00:14:22
看起来很像是一个大气泡, 你有给转膜系统降温么?
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2楼2014-09-15 22:42:47
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薛虹妮

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xipha at 2014-09-15 22:42:47
看起来很像是一个大气泡, 你有给转膜系统降温么?

有啊，放在大只的冰盒里面做的，槽子里还放了冰袋~~就想说除了气泡之外还有没有别的可能造成这种结果的原因。问了好多人都不清楚。
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3楼2014-09-16 00:14:13
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xipha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
薛虹妮: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-16 11:54:48
别的原因可以是转膜时胶没有放好(气泡), 电压/电流太高(过热气泡) , 转膜液没有加够(气泡), ...其它的一时想不起来. 言归正传, 再有就是你下次做的时候同时跑两块胶, 一块转膜一块考染, 然后你就能排除样品上可能的问题.
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4楼2014-09-16 08:23:33
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薛虹妮

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xipha at 2014-09-16 08:23:33
别的原因可以是转膜时胶没有放好(气泡), 电压/电流太高(过热气泡) , 转膜液没有加够(气泡), ...其它的一时想不起来. 言归正传, 再有就是你下次做的时候同时跑两块胶, 一块转膜一块考染, 然后你就能排除样品上可能 ...

哇哇谢谢~~今天再来一发！！
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5楼2014-09-16 11:55:05
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493260040

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
薛虹妮: 金币+1 2014-09-16 20:06:08
气泡的可能性很大

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2014-09-16 15:08:04
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉像是气泡，这个可能性比较大，先排除这个原因
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7楼2014-09-16 15:23:36
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1012316516

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
薛虹妮: 金币+1 2014-09-16 20:06:15
膜要压实，有气泡是不行的，还要注意在冰盒中操作
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8楼2014-09-16 15:28:17
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cavan

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
薛虹妮(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-19 16:28:53
三明治要夹紧，不能错位，气泡用玻璃棒擀走，还有要放冰袋，不然就会出现这样的情况。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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学无止境
9楼2014-09-19 11:07:42
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tsjxdr

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
薛虹妮(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-19 16:29:02
出了气泡之外 你的两块面包是不是干净的？而且温度控制哦，面包片不干净很不好
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10楼2014-09-19 11:36:36
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