应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物扩增效率太低，如何提高
201/2返回列表12下一页
查看: 8240  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

饿的神啊

新虫 (著名写手)

[求助] 引物扩增效率太低，如何提高 已有5人参与

引物扩增效率低，只有64.4%，但是相关性较高，达到0.997，怎么提高引物的扩增效率呢

引物扩增效率太低，如何提高
溶解曲线.png


引物扩增效率太低，如何提高-1
扩增.png


引物扩增效率太低，如何提高-2
扩增效率.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-09-11 15:50:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
饿的神啊: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-09-13 16:14:54
引用回帖:
14楼: Originally posted by 饿的神啊 at 2015-09-12 19:26:04
引物是不是都是在保守区设计的？我试过别的引物，软件评价不好，得分很低，有发夹，错配什么的，好纠结
...

设计引物的标准可以写满一本书，但是检测只有一条，试一试才知道。这是一件后验的事情，而且各种标准的概率还不高，有点尽人事，听天命的感觉。不过你还是得把人事尽了。。。
赞一下(2人) 回复此楼
16楼2015-09-13 13:52:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kobe199613

木虫之王 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
尝试提高dNTP浓度
在不影响扩增的条件下，适当降低退火温度，一般能解决。
当然稍微加大酶量也是起作用的。
赞一下(1人) 回复此楼
【招聘】医用高分子材料研发工程师（北京）
5楼2015-09-11 21:28:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王冠傑

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
饿的神啊: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-09-13 16:10:56
首先排除引物质量问题，建议您做一个纯度测试，找合成公司都可以免费做。如果引物本身质量没有问题的话你换个位置重新设计引物吧，5端at所占比例要高一些，3末端最好是g或者c。

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2015-09-12 06:47:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by biostar2009 at 2015-09-11 19:56:56
跟多少倍稀释有关系么？...

我不太确定，我们一般都是十倍稀释的。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2015-09-12 14:22:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

许彦

木虫 (正式写手)
你确定是十倍稀释吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2015-09-11 17:30:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2015-09-11 17:30:06
你确定是十倍稀释吗？

跟多少倍稀释有关系么？
赞一下 回复此楼
3楼2015-09-11 19:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-11 20:14:31
R2很好，说明测得很准，
但是引物的扩增效率几乎是引物的固有属性，说明你只有换个地方再设计试试了。
尤其是偏低的，一般也跟抑制剂没啥关系。
赞一下 回复此楼
4楼2015-09-11 19:58:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baichi121234

禁虫 (职业作家)
本帖内容被屏蔽
6楼2015-09-11 23:24:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

棍子168

至尊木虫 (著名写手)
怎么看扩增效率啊

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
天道酬勤
8楼2015-09-12 08:01:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vincent_hpax

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是比较低 建议换引物，合成的时候选择高纯度合成

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
博学 慎思 明辨 笃行
10楼2015-09-12 14:59:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 饿的神啊 的主题更新
201/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 6PrO1XyZ5URF 2026-11-13 3/150 2026-11-15 16:23 by 0aDbZAghdVq9
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 4/200 2026-11-15 14:11 by 0aDbZAghdVq9
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 10:52 by xSrQNSSjcgoX
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 4/200 2026-11-15 09:57 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 09:13 by xSrQNSSjcgoX
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 08:07 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 07:56 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 10/500 2026-11-15 00:39 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-14 21:58 by Equinoxhua
[考博] 27博士 +6 锦鲤送福至 2026-11-10 6/300 2026-11-14 21:23 by xupeii
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 9/450 2026-11-13 11:02 by Equinoxhua
[考博] 27博士申请（市政/环境） +3 ladf 2026-11-12 3/150 2026-11-13 08:19 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 6/300 2026-11-12 12:42 by ECLTXnJnRSXf
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:03 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:14 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:36 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:00 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭