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饿的神啊

新虫 (著名写手)

[求助] 引物扩增效率太低,如何提高 已有5人参与

引物扩增效率低,只有64.4%,但是相关性较高,达到0.997,怎么提高引物的扩增效率呢

引物扩增效率太低,如何提高
溶解曲线.png


引物扩增效率太低,如何提高-1
扩增.png


引物扩增效率太低,如何提高-2
扩增效率.jpg
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2015-09-11 17:30:06
你确定是十倍稀释吗?

跟多少倍稀释有关系么?
3楼2015-09-11 19:56:56
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许彦

木虫 (正式写手)

2楼2015-09-11 17:30:06
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-11 20:14:31
R2很好,说明测得很准,
但是引物的扩增效率几乎是引物的固有属性,说明你只有换个地方再设计试试了。
尤其是偏低的,一般也跟抑制剂没啥关系。
4楼2015-09-11 19:58:58
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kobe199613

木虫之王 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
尝试提高dNTP浓度
在不影响扩增的条件下,适当降低退火温度,一般能解决。
当然稍微加大酶量也是起作用的。
【招聘】医用高分子材料研发工程师(北京)
5楼2015-09-11 21:28:20
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