2楼: Originally posted by 许彦 at 2015-09-11 17:30:06
你确定是十倍稀释吗？

5楼: Originally posted by kobe199613 at 2015-09-11 21:28:20
尝试提高dNTP浓度
在不影响扩增的条件下，适当降低退火温度，一般能解决。
当然稍微加大酶量也是起作用的。

4楼: Originally posted by biostar2009 at 2015-09-11 19:58:58
R2很好，说明测得很准，
但是引物的扩增效率几乎是引物的固有属性，说明你只有换个地方再设计试试了。
尤其是偏低的，一般也跟抑制剂没啥关系。

9楼: Originally posted by 许彦 at 2015-09-12 14:22:14
我不太确定，我们一般都是十倍稀释的。
...

14楼: Originally posted by 饿的神啊 at 2015-09-12 19:26:04
引物是不是都是在保守区设计的？我试过别的引物，软件评价不好，得分很低，有发夹，错配什么的，好纠结
...

8楼: Originally posted by 棍子168 at 2015-09-12 08:01:00
怎么看扩增效率啊

15楼: Originally posted by biostar2009 at 2015-09-13 13:50:01


事实上没关系，本质上是对数换指数运算，其实跟底数关系不大，有兴趣你可以推推公式，一般而言用10，你要是来5个10倍梯度拉得太大，稀的Ct都不知道去哪了。。。显然也可以用5倍或者3倍...

4楼: Originally posted by biostar2009 at 2015-09-11 19:58:58
R2很好，说明测得很准，
但是引物的扩增效率几乎是引物的固有属性，说明你只有换个地方再设计试试了。
尤其是偏低的，一般也跟抑制剂没啥关系。