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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物扩增效率太低，如何提高
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饿的神啊

新虫 (著名写手)

[求助] 引物扩增效率太低，如何提高 已有5人参与

引物扩增效率低，只有64.4%，但是相关性较高，达到0.997，怎么提高引物的扩增效率呢

引物扩增效率太低，如何提高
溶解曲线.png


引物扩增效率太低，如何提高-1
扩增.png


引物扩增效率太低，如何提高-2
扩增效率.jpg
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1楼 2015-09-11 15:50:55
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
饿的神啊: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-09-13 16:14:54
引用回帖:
14楼: Originally posted by 饿的神啊 at 2015-09-12 19:26:04
引物是不是都是在保守区设计的？我试过别的引物，软件评价不好，得分很低，有发夹，错配什么的，好纠结
...

设计引物的标准可以写满一本书，但是检测只有一条，试一试才知道。这是一件后验的事情，而且各种标准的概率还不高，有点尽人事，听天命的感觉。不过你还是得把人事尽了。。。
赞一下(2人) 回复此楼
16楼2015-09-13 13:52:13
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许彦

木虫 (正式写手)
你确定是十倍稀释吗？

发自小木虫Android客户端
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2楼2015-09-11 17:30:06
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2015-09-11 17:30:06
你确定是十倍稀释吗？

跟多少倍稀释有关系么？
赞一下 回复此楼
3楼2015-09-11 19:56:56
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-11 20:14:31
R2很好，说明测得很准，
但是引物的扩增效率几乎是引物的固有属性，说明你只有换个地方再设计试试了。
尤其是偏低的，一般也跟抑制剂没啥关系。
赞一下 回复此楼
4楼2015-09-11 19:58:58
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