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饿的神啊

新虫 (著名写手)

[求助] 引物扩增效率太低,如何提高 已有5人参与

引物扩增效率低,只有64.4%,但是相关性较高,达到0.997,怎么提高引物的扩增效率呢

引物扩增效率太低,如何提高
溶解曲线.png


引物扩增效率太低,如何提高-1
扩增.png


引物扩增效率太低,如何提高-2
扩增效率.jpg
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
饿的神啊: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-09-13 16:14:54
引用回帖:
14楼: Originally posted by 饿的神啊 at 2015-09-12 19:26:04
引物是不是都是在保守区设计的?我试过别的引物,软件评价不好,得分很低,有发夹,错配什么的,好纠结
...

设计引物的标准可以写满一本书,但是检测只有一条,试一试才知道。这是一件后验的事情,而且各种标准的概率还不高,有点尽人事,听天命的感觉。不过你还是得把人事尽了。。。
16楼2015-09-13 13:52:13
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许彦

木虫 (正式写手)

2楼2015-09-11 17:30:06
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2015-09-11 17:30:06
你确定是十倍稀释吗?

跟多少倍稀释有关系么?
3楼2015-09-11 19:56:56
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-11 20:14:31
R2很好,说明测得很准,
但是引物的扩增效率几乎是引物的固有属性,说明你只有换个地方再设计试试了。
尤其是偏低的,一般也跟抑制剂没啥关系。
4楼2015-09-11 19:58:58
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