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千寻回眸

铁杆木虫 (正式写手)

研究生

[求助] 求大神教教我怎么用c18柱来分析这个化合物 已有5人参与

用多少的流动相比例,跑了好多次都跑不出满意的结果

求大神教教我怎么用c18柱来分析这个化合物
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longyi706565

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道“不理想”是指什么方面不理想?峰展宽??拖尾??还是什么?
能稍微说下你现在的条件吗?最好给张色谱图看看。
这么大的结构,这么多的氨基,又是水溶性的,个人感觉考虑用碱性柱试试,比如:waters xterra系列
5楼2015-08-31 15:04:55
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xmin828

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的分析目标是啥?因为感觉你这个图峰很杂 在3Min那块有个大峰 那肯定不是溶剂峰吧
如果只是单纯的要把这个物质分开 很简单的 我看你水:乙腈(70:30)峰形还不错,就是出峰较晚,考虑一下提高有机相比例?
你这个物质应该算多肽了吧,建议查查药典肽类的分析,参考一下相关条件
9楼2015-08-31 15:31:49
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longyi706565

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 千寻回眸 at 2015-08-31 15:17:06
极性这么大,他会被保留一段时间吗...

没办法确定你的主峰?
建议你跑个全梯度吧,t/%乙腈(0/10,20/90,25/90,26/10),这个应该看得懂的吧?
10楼2015-08-31 15:33:19
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xmin828

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by 千寻回眸 at 2015-08-31 15:42:56
峰杂的我也不知道哪个是我的产物了,它的极性这么大,不是很快就会下来吗?水:乙腈(70:30)跑出来的那个出峰时间那么晚,感觉是不是目标物啊...

给你放个醋酸奥曲肽的分析方法(ChP 2015)你参考一下,多在药典里找找

有关物质取本品适量5加水溶解并稀释制成每lm l中约含0.125 mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取1 mL,置50ml量 瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件,精密量取供试品溶液和对照溶液各100 uL,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5 倍(1.0% ) ,各杂质峰面积总和不得大于对照溶液主峰面积(2.0% )。

【含量测定】照高效液相色谱法(通则0512)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以四甲基氢氧化铵溶液(取10%四甲基氢氧化铵溶液20 mL,加水880 mL,用10%磷酸溶液调pH值至5.4) -乙腈(900:100)作为流动相A,以四甲基氢氧化铵溶液(取10%四甲基氢氧化铵溶液20 mL,加水380 mL,用10%磷酸溶液调pH值至5.4)-乙腈(400:600)作为流动相检B;测波长为210 nm;按下表进行梯度洗脱。取脱苏氨醇奥曲肽与醋酸奥曲肽对照品适量,加水溶解并稀释制成每1 mL中约含脱苏氨醇奥曲肽10 ug和醋酸奥曲肽0.1 mg的混合溶液,取20 uL注人液相色谱仪,记录色谱图,理论板数按奥曲肽峰计算不低于3000;脱苏氨醇奥曲肽峰与奥曲肽峰的分离度应符合要求。
18楼2015-08-31 16:02:47
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xuchao7447

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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为什么用220nm的波长,多肽280nm不是更好嘛!
生活就是如此
21楼2015-08-31 16:25:53
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匿名

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2楼2015-08-31 14:55:07
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千寻回眸

铁杆木虫 (正式写手)

研究生

产物是用水溶的,波长在220nm
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3楼2015-08-31 14:55:23
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千寻回眸

铁杆木虫 (正式写手)

研究生

引用回帖:
2楼: Originally posted by lich666 at 2015-08-31 14:55:07
这么大分子,还是带氨基的,C18不一定好,加点三乙胺或者庚烷磺酸钠当改性剂吧。

我用的是乙腈和水,都加了千分之一的三氟乙酸,可跑出来的根本没法看
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4楼2015-08-31 15:01:29
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千寻回眸

铁杆木虫 (正式写手)

研究生

引用回帖:
5楼: Originally posted by longyi706565 at 2015-08-31 15:04:55
不知道“不理想”是指什么方面不理想?峰展宽??拖尾??还是什么?
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这么大的结构,这么多的氨基,又是水溶性的,个人感觉考虑用碱性柱试试,比如:waters xter ...

你看看
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6楼2015-08-31 15:10:37
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千寻回眸

铁杆木虫 (正式写手)

研究生

引用回帖:
5楼: Originally posted by longyi706565 at 2015-08-31 15:04:55
不知道“不理想”是指什么方面不理想?峰展宽??拖尾??还是什么?
能稍微说下你现在的条件吗?最好给张色谱图看看。
这么大的结构,这么多的氨基,又是水溶性的,个人感觉考虑用碱性柱试试,比如:waters xter ...

极性这么大,他会被保留一段时间吗
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7楼2015-08-31 15:17:06
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longyi706565

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 千寻回眸 at 2015-08-31 15:10:37
你看看

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...

哪个是主峰啊?前面的还是后面的?
8楼2015-08-31 15:29:58
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