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倔强的柠檬片

新虫 (小有名气)

[求助] 色谱峰分离问题 已有7人参与

在做糖的分离,用的是HILIC柱,流动相是乙腈和甲酸-甲酸铵缓冲液
流动相比例为 0 : 80% (乙腈)+20%(缓冲液)
                    30:    60%(乙腈)+40%(缓冲液)
                    40: 10%  (乙腈)+90%(缓冲液)
色谱图如下:
怎样调节流动相才能让虚线部分的峰更好一点呢?求大神指教,万分感激

色谱峰分离问题
图.jpg
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seannoy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
倔强的柠檬片: 金币+1, 有帮助, 感谢 2015-08-26 14:51:49
为啥不直接用80%或70%的乙腈水呢。。。跑等度吧。。。
欢迎多多批评指正
2楼2015-08-26 08:50:38
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倔强的柠檬片

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by seannoy at 2015-08-26 08:50:38
为啥不直接用80%或70%的乙腈水呢。。。跑等度吧。。。

为什么不用缓冲溶液而用水跑等度呢?
3楼2015-08-26 08:58:41
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seannoy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 倔强的柠檬片 at 2015-08-26 08:58:41
为什么不用缓冲溶液而用水跑等度呢?...

我们这边一直都是70%乙腈分离糖的  我也不知道为啥不加缓冲
欢迎多多批评指正
4楼2015-08-26 09:00:21
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
倔强的柠檬片: 金币+1, 有帮助, 谢谢 2015-08-26 14:51:09
浓度太低也有一定的关系
5楼2015-08-26 09:01:05
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倔强的柠檬片

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wyy080214 at 2015-08-26 09:01:05
浓度太低也有一定的关系

为什么到最后会飘呢?
6楼2015-08-26 09:31:19
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 倔强的柠檬片 at 2015-08-26 09:31:19
为什么到最后会飘呢?...

因为梯度的缘故
7楼2015-08-26 11:08:47
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倔强的柠檬片

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wyy080214 at 2015-08-26 11:08:47
因为梯度的缘故...

要峰形好看一点的话该怎么调节流动相呢?
8楼2015-08-26 14:21:30
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 倔强的柠檬片 at 2015-08-26 14:21:30
要峰形好看一点的话该怎么调节流动相呢?...

更换色谱柱,或者选择合适的流动相
9楼2015-08-26 14:43:37
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wjsj-1029

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
30到40分钟梯度变化太快了,而且想请教您这梯度的前30分钟也是由您要做的糖成分出峰吗?流动相梯度过都大,会导致基线严重漂移,流动相和流量不稳定可定会引起基线漂移的。前期还好,后期噪音太大啦。建议等度。
10楼2015-08-26 14:43:49
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