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倔强的柠檬片

新虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by liuwei10987 at 2015-08-26 17:32:11
是ELSD检测的吧?漂移管温度设置多少℃?水相比例越来越大,而且有盐,温度应该高于70℃

是用的ELSD,飘移管温度85
21楼2015-08-26 18:56:47
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倔强的柠檬片

新虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by liuwei10987 at 2015-08-26 17:32:11
是ELSD检测的吧?漂移管温度设置多少℃?水相比例越来越大,而且有盐,温度应该高于70℃

有什么好方法吗?
22楼2015-08-26 18:57:11
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liuwei10987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
21楼: Originally posted by 倔强的柠檬片 at 2015-08-26 18:56:47
是用的ELSD,飘移管温度85...

可能你的水相流动相不干净,盐里的杂质多。
23楼2015-08-27 09:23:55
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倔强的柠檬片

新虫 (小有名气)

引用回帖:
23楼: Originally posted by liuwei10987 at 2015-08-27 09:23:55
可能你的水相流动相不干净,盐里的杂质多。...

流动相都是新配的,甲酸铵是化学纯的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
24楼2015-08-27 12:23:14
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zy2010

铁杆木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从你的图中看出你这个色谱图漂移过大,且后面分离度较差,最主要的原因是梯度过大,还有就是你流动相的比例选择。缓冲液是否选取主要是为了保持你糖的存在形态稳定,能不加可以不加,如果糖的组分不多能等度洗脱的就不要梯度,只有当分离度达不到要求或是分离时间过长时考虑梯度。通常对于反相色谱柱而言,有机相的比例越高出峰越快,按照你这个思路,刚开始让所有峰快出然后又慢慢拉开,当然越往后越容易峰脱了,但考虑这个的时候也不单单如此,也和溶解性有关,还有就是出峰慢的组分本身峰就容易脱,因为它与色谱柱作用时间长。建议可以先等度试试,确定具体比例,溶解性一定要好,如果效果不好再调。
25楼2015-08-27 14:18:17
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1336768414

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

流动相中加缓冲盐就会造成基线漂移,如果不加缓冲液呢?
26楼2015-09-01 10:42:10
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