| 查看: 3344 | 回复: 18 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
大肠杆菌培养出现严重问题，紧急求助 已有8人参与
|
||
|
最近实验室摇菌出现下列问题，不知道是否为噬菌体，希望有经验的诸位能够给出一些建议。 1. 在相同的培养箱当中，同时进行小管摇菌，一些管子明显不生长，或生长缓慢。培养基相同，抗生素相同，单菌落来自用已确定序列的质粒转化的BL21。 2. 在相同培养条件下，进行200-1 L培养时，初期生长没有问题。OD达到0.45-0.8左右进行诱导。平行3或4瓶时会出现一瓶16度24小时OD只到0.9左右，或OD到2或3但收菌时上清有絮状物浮沫。所有培养基、瓶子都已灭菌，IPTG已用.22微米滤膜过滤，取样测OD时同时在开放环境或超净台中取样于离心管中。 3. 采用TB表达时，5000g以下转速收集的菌体呈现偏绿褐色的豆腐渣状态，无法集中在瓶底，而且明显OD值很低。已知实验室相同菌株在相同条件下表达，菌体会呈现黄色或淡红褐色状态。 上述情况在多瓶或多管表达时尤其明显，但并非是所有样品都会出现上述情况。而且所有大量表达的实验在诱导前生长状态良好，似乎不是菌株自带污染。 希望大家能提供一些经验，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
国自然评审意见
已经有8人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有14人回复
-
系统查不到
已经有11人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有18人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有12人回复
-
有没有仍没收到信息的
已经有3人回复
-
导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！
已经有8人回复
-
基金不中，共勉
已经有11人回复
-
麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上）
已经有9人回复
-
2026年叶企孙基金
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大肠杆菌培养问题
已经有0人回复
- 正要发酵优化一种广谱的还原酶，感觉优化潜力堪忧啊！
已经有1人回复
- 大肠杆菌RNA提取求大虾帮忙
已经有9人回复
- 细菌接种后不生长？？
已经有7人回复
- 寻求小木虫的医学专家咨询一症状，谢谢
已经有4人回复
- 剖宫产瘢痕部位妊娠病例诊治
已经有1人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 李斯特菌专爱欺老凌弱
已经有1人回复
- 质粒DNA提取成了这样，请大家帮忙分析一下
已经有27人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 警示：“大肠杆菌”正流行，生吃蔬菜有风险
已经有5人回复
- 转：婴幼儿发生腹泻种种原因分析
已经有4人回复
- 【其他】不同部位抗生素选用
已经有1人回复
- 【转帖】吸系统感染时抗生素的选用­
已经有3人回复
- 【交流】抗菌药物临床应用问答
已经有16人回复
- 【转帖】大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的从属关系及介绍
已经有2人回复
- 【转帖】培养细胞的污染及排除
已经有5人回复
- 【分享】实验室有毒物质--触目惊心
已经有53人回复
mazhenggen
铁虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 3942.8
- 红花: 19
- 帖子: 944
- 在线: 132.7小时
- 虫号: 688029
- 注册: 2009-01-05
- 性别: GG
- 专业: 肿瘤生物治疗
6楼2015-08-23 11:40:09
hajierlove
铜虫 (正式写手)
- 应助: 44 (小学生)
- 金币: 197.8
- 散金: 130
- 红花: 15
- 沙发: 1
- 帖子: 427
- 在线: 175.7小时
- 虫号: 2346230
- 注册: 2013-03-14
- 性别: MM
- 专业: 生态学
2楼2015-08-21 23:00:53
huangxin2011 
捐助贵宾 (小有名气)
- 应助: 65 (初中生)
- 金币: 2482.9
- 散金: 2176
- 红花: 7
- 帖子: 189
- 在线: 157.8小时
- 虫号: 1481126
- 注册: 2011-11-07
- 专业: 纳米医学
3楼2015-08-22 10:58:29
4楼2015-08-22 15:42:57
投票:
30