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zeroon木虫 (正式写手)
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做亚细胞定位，主要是定位液泡，请问融合蛋白表达载体应该如何构建呢 已有2人参与
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看到文献中，液泡中的的蛋白酶——羧肽酶，常作为marker蛋白定位，既给这个蛋白融合一段gfp，然后在细胞内即可定位液泡的位置。 但是找了好多文献，都没具体写清楚分子构建那地方是怎么样的。 我应该在羧肽酶基因的后面直接跟着加上gfp序列呢，还是中间隔开几个序列再加？看到这篇文献Visualization of vacuoles in Aspergillus oryzae by expression of CPY–EGFP。 里面提到First,the CPY–EGFP expression plasmid was constructed to constitutively express CPY–EGFP fusion protein,which contains six amino acids between CPY and EGFP,under A. oryzae pgkA promoter,which is a constitutively expressing strong promoter of 3-phosphoglycerate kinase gene。 我觉得好奇怪啊，为什么在CPY和EGFP之间加入6个氨基酸呢？而且这篇文章通篇也没写清楚到底这6个氨基酸是什么？ 求做过相关研究的大神给与指导，不慎感激。 |
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