| 查看: 794 | 回复: 3 | |||
[求助]
求助，怎样才能做好细菌DGGE图 已有2人参与
|
本人正在做细菌DGGE，但是出来的图条带模糊一片，而且跑不开，细菌PCR扩增条带都是很亮的，我做的胶是20%-40%，90v电泳12h,染色20min,求助为什么跑出来的图如下面这样呢？请各位大神指点指点。。。。。。 1.PNG  2.PNG |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有6人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
面上意见出来了
已经有16人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有11人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有18人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有16人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有4人回复
shanliwademen
木虫 (正式写手)
- 应助: 27 (小学生)
- 金币: 1426.9
- 红花: 4
- 帖子: 314
- 在线: 200.1小时
- 虫号: 287482
- 注册: 2006-10-21
- 性别: GG
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
顾钻研: 金币+3 2015-08-13 14:44:36
感谢参与，应助指数 +1
顾钻研: 金币+3 2015-08-13 14:44:36
|
根据你的描述和从图上看，主要存在两个问题，一是胶不合适，主要是不同浓度变性剂的胶没有混成梯度，而是电泳条件不合适。所以建议如下，1,如果变性剂是用的尿素，请用30%和60%的胶，而且要事先用红蓝胶模拟配胶确保变性梯度均匀，2，请用，105伏电压10小时电泳。同时注意两个小问题，1，保证电泳液恒温，如果电泳4小时后电泳液温度上升太高会出现彗星泳道，2,微量上样器点样是不飘不穿无气泡。当然我以上所说是认为你pcr的DNA是没问题的，但看你的pcr结果我还是不放心，建议下次加对照。上述为鄙人拙见，如有不妥之处请批评指正。 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
2楼2015-08-13 01:29:16
3楼2015-08-13 14:44:28
4楼2015-08-19 10:08:28
30