应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 无缝克隆连接
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 3231  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

低头哼小调

金虫 (初入文坛)

[求助] 无缝克隆连接 已有3人参与

采用无缝克隆连接启动子和基因，先是用无缝克隆设计的引物扩增启动子和基因，对载体双酶切，然后连接转化，用启动子引物PCR鉴定，大小正确，送测序，启动子融合基因大小为4000bp左右，但测序结果是1000bp左右，请大神指点！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-08-11 10:05:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

棍子168

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:41
一般一个测序反应大约就是1000个bp，开头的不可信，大约700个可信。你的4000如果要测通需要6个反应，并且需要有重叠部分，希望能帮到你。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
天道酬勤
2楼2015-08-11 23:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky0328

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:54
1，是否确定你的测序列已经完全测通
2，可以再用个目的基因的引物扩增看看
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-08-22 14:19:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋进的女孩

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 棍子168 at 2015-08-11 23:54:14
一般一个测序反应大约就是1000个bp，开头的不可信，大约700个可信。你的4000如果要测通需要6个反应，并且需要有重叠部分，希望能帮到你。

我还想问下您！一般连接后测序是整个测通还是测部分？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-08-24 00:09:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

棍子168

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 奋进的女孩 at 2015-08-24 00:09:43
我还想问下您！一般连接后测序是整个测通还是测部分？
...

一般测两端的就行了，如果比较严谨需要测通

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
5楼2015-08-24 00:15:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

那雨那女孩

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 棍子168 at 2015-08-24 00:15:42
一般测两端的就行了，如果比较严谨需要测通
...

求帮忙，谢谢！！想问一下，无缝克隆的时候，插入基因要考虑阅读框会不会移码吗？
赞一下 回复此楼
辟邪
6楼2016-01-19 12:50:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

棍子168

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 那雨那女孩 at 2016-01-19 12:50:16
求帮忙，谢谢！！想问一下，无缝克隆的时候，插入基因要考虑阅读框会不会移码吗？...

可能会译码，需要考虑译码

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
天道酬勤
7楼2016-01-19 15:41:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

那雨那女孩

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 棍子168 at 2016-01-19 15:41:45
可能会译码，需要考虑译码
...

大神，麻烦帮我看一下下面的问题好吗？谢谢！！
无缝克隆连接
未标题-1.jpg
赞一下 回复此楼
辟邪
8楼2016-01-19 21:16:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 低头哼小调 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0805求调剂 +5 是水分 2026-03-31 5/250 2026-03-31 20:48 by yuq
[考研] 求调剂，一志愿北林食品与营养095500，301分，已过六级，有科研经历 +3 快乐储蓄罐 2026-03-31 3/150 2026-03-31 20:20 by plum
[考研] 085602 307分 求调剂 +10 不知道叫什么！ 2026-03-26 10/500 2026-03-31 19:53 by Dyhoer
[考研] 340求调剂 +4 希望如此i 2026-03-31 4/200 2026-03-31 16:40 by 690616278
[考研] 化学0703 调剂 306分 一志愿211 +10 26要上岸 2026-03-28 10/500 2026-03-31 16:04 by 记事本2026
[考研] 08工科，295，接受跨专业调剂 +4 lmnlzy 2026-03-31 4/200 2026-03-31 15:25 by 西京学院招办
[考研] 土木304求调剂 +3 顶级擦擦 2026-03-31 3/150 2026-03-31 13:59 by 西京学院招办
[考研] 一志愿大连理工大学，机械工程学硕，341 +3 西瓜田的守望者 2026-03-30 3/150 2026-03-31 11:08 by asdfzly
[考研] 08工科，295，接受跨专业调剂 +6 lmnlzy 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 282求调剂 +3 呼吸都是减肥 2026-03-31 3/150 2026-03-31 10:00 by wangjy2002
[考研] 085601一志愿西北工业大学初试346 +4 085601初试346 2026-03-30 4/200 2026-03-31 07:47 by jp9609
[考研] 一志愿华中师范化学332分求调剂 +3 Lyy930824@ 2026-03-29 3/150 2026-03-30 20:15 by DHUSHUAI
[考研] 071010 323 分求调剂 +3 Baekzhy 2026-03-27 3/150 2026-03-30 14:24 by andresqi
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-03-26 6/300 2026-03-29 01:11 by hanserlol
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 339求调剂，想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-27 7/350 2026-03-28 07:43 by 热情沙漠
[考研] 085600，材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭