应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 无缝克隆连接
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3227  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

低头哼小调

金虫 (初入文坛)

[求助] 无缝克隆连接 已有3人参与

采用无缝克隆连接启动子和基因，先是用无缝克隆设计的引物扩增启动子和基因，对载体双酶切，然后连接转化，用启动子引物PCR鉴定，大小正确，送测序，启动子融合基因大小为4000bp左右，但测序结果是1000bp左右，请大神指点！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-08-11 10:05:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋进的女孩

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 棍子168 at 2015-08-11 23:54:14
一般一个测序反应大约就是1000个bp，开头的不可信，大约700个可信。你的4000如果要测通需要6个反应，并且需要有重叠部分，希望能帮到你。

我还想问下您！一般连接后测序是整个测通还是测部分？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-08-24 00:09:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

棍子168

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:41
一般一个测序反应大约就是1000个bp，开头的不可信，大约700个可信。你的4000如果要测通需要6个反应，并且需要有重叠部分，希望能帮到你。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
天道酬勤
2楼2015-08-11 23:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky0328

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:54
1，是否确定你的测序列已经完全测通
2，可以再用个目的基因的引物扩增看看
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-08-22 14:19:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

棍子168

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 奋进的女孩 at 2015-08-24 00:09:43
我还想问下您！一般连接后测序是整个测通还是测部分？
...

一般测两端的就行了，如果比较严谨需要测通

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
5楼2015-08-24 00:15:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 359求调剂 +3 邓邓邓书书 2026-03-25 3/150 2026-03-31 19:09 by xhai2011
[考研] 304求调剂 +8 素年祭语 2026-03-31 11/550 2026-03-31 18:20 by 无际的草原
[考研] 286分调剂 +11 Faune 2026-03-30 13/650 2026-03-31 17:28 by michael2011
[考研] 机械学硕总分317求调剂！！！！ +6 Acaciad 2026-03-25 6/300 2026-03-31 16:52 by asdfzly
[考研] 理学07化学 303求调剂 +8 睿08 2026-03-27 8/400 2026-03-31 16:31 by 690616278
[考研] 物理学调剂 +4 小羊36 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:16 by lishahe
[考研] 一志愿085600中科院宁波所276分求调剂 +12 材料学257求调剂 2026-03-28 13/650 2026-03-31 14:30 by 六翼TMR
[考研] 一志愿北化085600材料专硕275|有文章专利｜求调剂 +15 Micky11223 2026-03-25 16/800 2026-03-31 12:15 by oooqiao
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-29 3/150 2026-03-31 10:06 by cal0306
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
[考研] 083000环境科学与工程调剂，总分281 +4 橙子（胜意） 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 085602化工求调剂（331分） +8 111@127 2026-03-30 8/400 2026-03-30 21:23 by 研究僧导导
[考研] 各位老师好，我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +10 Koxui 2026-03-28 10/500 2026-03-30 19:33 by 源_2020
[考研] 297求调剂 +17 田洪有 2026-03-26 18/900 2026-03-30 18:32 by nothing投稿中
[考研] 310求调剂 +10 争取九点睡 2026-03-30 10/500 2026-03-30 16:45 by ztnimte
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 071010 323 分求调剂 +3 Baekzhy 2026-03-27 3/150 2026-03-30 14:24 by andresqi
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 071000生物学求调剂，初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭