应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 无缝克隆连接
51/1返回列表
查看: 3220  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

低头哼小调

金虫 (初入文坛)

[求助] 无缝克隆连接 已有3人参与

采用无缝克隆连接启动子和基因，先是用无缝克隆设计的引物扩增启动子和基因，对载体双酶切，然后连接转化，用启动子引物PCR鉴定，大小正确，送测序，启动子融合基因大小为4000bp左右，但测序结果是1000bp左右，请大神指点！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-08-11 10:05:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky0328

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:54
1，是否确定你的测序列已经完全测通
2，可以再用个目的基因的引物扩增看看
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-08-22 14:19:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

棍子168

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:41
一般一个测序反应大约就是1000个bp，开头的不可信，大约700个可信。你的4000如果要测通需要6个反应，并且需要有重叠部分，希望能帮到你。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
天道酬勤
2楼2015-08-11 23:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋进的女孩

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 棍子168 at 2015-08-11 23:54:14
一般一个测序反应大约就是1000个bp，开头的不可信，大约700个可信。你的4000如果要测通需要6个反应，并且需要有重叠部分，希望能帮到你。

我还想问下您！一般连接后测序是整个测通还是测部分？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-08-24 00:09:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

棍子168

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 奋进的女孩 at 2015-08-24 00:09:43
我还想问下您！一般连接后测序是整个测通还是测部分？
...

一般测两端的就行了，如果比较严谨需要测通

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
5楼2015-08-24 00:15:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 8/400 2026-03-01 22:50 by jian_
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 化工专硕342，一志愿大连理工大学，求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[基金申请] 刚录用，没有期刊号，但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭