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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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低头哼小调

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 无缝克隆连接 已有3人参与

采用无缝克隆连接启动子和基因,先是用无缝克隆设计的引物扩增启动子和基因,对载体双酶切,然后连接转化,用启动子引物PCR鉴定,大小正确,送测序,启动子融合基因大小为4000bp左右,但测序结果是1000bp左右,请大神指点!!!
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sky0328

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:54
1,是否确定你的测序列已经完全测通
2,可以再用个目的基因的引物扩增看看
3楼2015-08-22 14:19:41
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棍子168

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:41
一般一个测序反应大约就是1000个bp,开头的不可信,大约700个可信。你的4000如果要测通需要6个反应,并且需要有重叠部分,希望能帮到你。

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
2楼2015-08-11 23:54:14
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奋进的女孩

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 棍子168 at 2015-08-11 23:54:14
一般一个测序反应大约就是1000个bp,开头的不可信,大约700个可信。你的4000如果要测通需要6个反应,并且需要有重叠部分,希望能帮到你。

我还想问下您!一般连接后测序是整个测通还是测部分?

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-08-24 00:09:43
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棍子168

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 奋进的女孩 at 2015-08-24 00:09:43
我还想问下您!一般连接后测序是整个测通还是测部分?
...

一般测两端的就行了,如果比较严谨需要测通

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
5楼2015-08-24 00:15:42
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