24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3238  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

低头哼小调

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 无缝克隆连接 已有3人参与

采用无缝克隆连接启动子和基因,先是用无缝克隆设计的引物扩增启动子和基因,对载体双酶切,然后连接转化,用启动子引物PCR鉴定,大小正确,送测序,启动子融合基因大小为4000bp左右,但测序结果是1000bp左右,请大神指点!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

那雨那女孩

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
5楼: Originally posted by 棍子168 at 2015-08-24 00:15:42
一般测两端的就行了,如果比较严谨需要测通
...

求帮忙,谢谢!!想问一下,无缝克隆的时候,插入基因要考虑阅读框会不会移码吗?
辟邪
6楼2016-01-19 12:50:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

棍子168

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:41
一般一个测序反应大约就是1000个bp,开头的不可信,大约700个可信。你的4000如果要测通需要6个反应,并且需要有重叠部分,希望能帮到你。

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
2楼2015-08-11 23:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky0328

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:54
1,是否确定你的测序列已经完全测通
2,可以再用个目的基因的引物扩增看看
3楼2015-08-22 14:19:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋进的女孩

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 棍子168 at 2015-08-11 23:54:14
一般一个测序反应大约就是1000个bp,开头的不可信,大约700个可信。你的4000如果要测通需要6个反应,并且需要有重叠部分,希望能帮到你。

我还想问下您!一般连接后测序是整个测通还是测部分?

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-08-24 00:09:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0805求调剂 +5 是水分 2026-03-31 5/250 2026-03-31 20:48 by yuq
[考研] 调剂 +4 好好读书。 2026-03-28 6/300 2026-03-31 20:35 by 好好读书。
[考研] 复试调剂 +7 双马尾痞老板2 2026-03-31 7/350 2026-03-31 19:49 by Dyhoer
[考研] 284求调剂 +9 小熊~~ 2026-03-31 9/450 2026-03-31 18:22 by 253863592
[考研] 0710生物学求调剂! +5 叙述文 2026-03-31 5/250 2026-03-31 17:32 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +9 akdhjs 2026-03-31 10/500 2026-03-31 17:14 by zhyzzh
[考研] 求化学调剂 +12 wulanna 2026-03-28 12/600 2026-03-31 16:38 by 690616278
[考研] 生物学 296 求调剂 +7 朵朵- 2026-03-26 9/450 2026-03-31 14:26 by jp9609
[考研] 287求调剂 +17 land xuxu 2026-03-26 17/850 2026-03-31 11:16 by Zzxxxs
[考研] 266分,求材料相关专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-03-30 12/600 2026-03-31 11:00 by 熊一刀
[考研] 085701环境工程求调剂 +11 多久上课 2026-03-27 12/600 2026-03-30 21:21 by 研究僧导导
[考研] 304材料求调剂 +5 钟llll 2026-03-26 5/250 2026-03-30 19:37 by 源_2020
[考研] 284求调剂 +14 junqihahaha 2026-03-26 15/750 2026-03-30 14:12 by 探123
[考研] 295求调剂 +5 wei-5 2026-03-26 5/250 2026-03-30 08:34 by 探123
[考研] 329求调剂 +10 钮恩雪 2026-03-25 10/500 2026-03-29 13:32 by peike
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 材料求调剂一志愿哈工大324 +7 闫旭东 2026-03-28 9/450 2026-03-28 08:51 by Xu de nuo
[考研] 0703化学求调剂,各位老师看看我!!! +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕,求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 8/400 2026-03-27 19:22 by 丶风雪夜归人丶
信息提示
请填处理意见