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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 磷酸盐缓冲液流动相
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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mingfengpbpb

木虫 (正式写手)

[求助] 磷酸盐缓冲液流动相 已有2人参与

1、我在做一个抗生素的含量测定，流动相是磷酸盐缓冲液：乙腈88:12，C18柱子，一直不太明白，流动相里加盐的作用是什么？是为了保持PH值不变吗？
2、做了两个月左右了，柱子就分不开峰了，工程师过来把填料重新装了一下，然后我用流动相走了几针标品（用水配制的），峰型非常不好，峰面积还很低。然后换用水：乙腈95:5冲柱子，结果在2min左右出了一个大峰，随后我又进了一针标品，还是用的水：乙腈95:5，结果在9min出峰，这样是说明流动相中乙腈比例太高了吗？或者是其他的什么原因呢？请各位大神指点，不胜感激。
3、流动相带盐太伤柱子了，能不能不加盐呢？
4、药典里流动相是磷酸盐：乙腈98:2，当时用这根柱子时，我是从98:2一点点加大有机相比例的，为的是把保留时间提前到合适的位置。
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自强不息
1楼 2015-08-05 22:15:53
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lingshu

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mingfengpbpb: 金币+4 2015-08-10 08:57:30
引用回帖:
3楼: Originally posted by mingfengpbpb at 2015-08-06 16:03:46
流动相里一直都是有磷酸盐的。我这样做完了用水：乙腈90:10冲柱子可以吗？一般都要冲多久呢？...

可以   先用百分之十乙腈冲洗柱子   再用纯甲醇或者乙腈冲洗   使柱子最终保持在纯有机相中    下次用的时候如果还需要用含有盐类的流动相则需要继续用百分之十乙腈冲洗再过度到含盐流动相

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5楼2015-08-07 19:52:52
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mingfengpbpb: 金币+2 2015-08-06 15:57:27
楼主，第一个问题：加入磷酸盐是对C18柱子有一定的改性作用，增强其分离的能力，及维持流动相在一定的ph环境中，保持必测物保持在一定分子形态中，不易发生离解。
第二个问题：水：乙腈=95:5的话，是不是太伤反相柱了，水相太高会伤柱。峰型不好应该是你流动相的ph值环境的问题，尝试加入磷酸盐调节环境。
第三个问题：这个答案需要视分析情况而定，如果可以加入磷酸、甲酸、乙酸等，也可以。
祝楼主实验成功~~~~~~~
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2楼2015-08-06 11:26:38
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mingfengpbpb

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by raulsam1984 at 2015-08-06 11:26:38
楼主，第一个问题：加入磷酸盐是对C18柱子有一定的改性作用，增强其分离的能力，及维持流动相在一定的ph环境中，保持必测物保持在一定分子形态中，不易发生离解。
第二个问题：水：乙腈=95:5的话，是不是太伤反相柱 ...

流动相里一直都是有磷酸盐的。我这样做完了用水：乙腈90:10冲柱子可以吗？一般都要冲多久呢？
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自强不息
3楼2015-08-06 16:03:46
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
mingfengpbpb: 金币+4 2015-08-10 08:58:04
mingfengpbpb: 金币+4 2015-08-10 08:58:46
引用回帖:
3楼: Originally posted by mingfengpbpb at 2015-08-06 16:03:46
流动相里一直都是有磷酸盐的。我这样做完了用水：乙腈90:10冲柱子可以吗？一般都要冲多久呢？...

楼主，虽然乙腈也是有机溶剂，但希望最好不要用乙腈来冲柱。因为乙腈的粘度比甲醇大，如果你是用waters2695的液相，很容易导致单向阀的红宝石粘住了，以后会漏液的。冲柱子的原则是冲20倍的柱体积，水：乙腈的比例从90:10→10:90→100%乙醇。C18柱子保存在纯甲醇里面比较好。
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4楼2015-08-07 09:40:01
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