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wangtian3778

铜虫 (正式写手)

[求助] 类似阿奇霉素的药物HPLC测定时流动相析出

各位虫友:大家好~
      最近做了一种类似阿奇霉素的大环内脂化合物。HPLC测定含量时,使用流动相是磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇,流动相析出,且响应值较低,怎么办啊~ 谢谢啦
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
古可ぷ: 金币+5, DRDEPI+1, 专业啊 2013-03-04 19:10:37
wangtian3778: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-03-05 08:04:08
析出原因分析:
1、磷酸盐浓度太高,一般10~30mM
2、流动相组分,有机相比例太高
3、流动相与样品相容性差

响应值低原因分析:
1、样品与流动相相容性差
2、波长选择不宜,可选最大吸收波长或最佳吸收波长
3、检测器性能问题(因为已出现问题,这种情况就不太可能了,几率很低)

改进方法:
1、了解化合物的结构、分子量、pKa、UV、样品浓度范围、溶解度等
2、参照相关文献检测体系,稍加改进
3、既然流动相体系为反相,流动相可以改为磷酸盐缓冲液-乙腈,没必要搞那么复杂吧?


好久没搞液相了,大概就说这些吧。
守候在风中的宁静。
2楼2013-03-04 17:23:56
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wangtian3778

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2013-03-04 17:23:56
析出原因分析:
1、磷酸盐浓度太高,一般10~30mM
2、流动相组分,有机相比例太高
3、流动相与样品相容性差

响应值低原因分析:
1、样品与流动相相容性差
2、波长选择不宜,可选最大吸收波长或最佳吸收波长
...

谢谢您~ 我是帮课题组咨询的,因为测该药物的时候,流动相比例不好调整,不是前沿就是拖尾。谢谢您的意见,哈哈
3楼2013-03-05 08:03:57
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痴夷子皮

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引用回帖:
3楼: Originally posted by wangtian3778 at 2013-03-05 08:03:57
谢谢您~ 我是帮课题组咨询的,因为测该药物的时候,流动相比例不好调整,不是前沿就是拖尾。谢谢您的意见,哈哈...

可以尝试从柱温、样品稀释剂(用流动相溶解样品)、进样体积、加三乙胺屏蔽硅羟基活性、更换色谱柱、调整流动相等方面改善这种峰型不好的情况,但不建议使用离子对。
守候在风中的宁静。
4楼2013-03-05 08:20:45
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wangtian3778

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2013-03-05 08:20:45
可以尝试从柱温、样品稀释剂(用流动相溶解样品)、进样体积、加三乙胺屏蔽硅羟基活性、更换色谱柱、调整流动相等方面改善这种峰型不好的情况,但不建议使用离子对。...

好的~
5楼2013-03-05 08:23:12
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