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wangtian3778

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[求助] 类似阿奇霉素的药物HPLC测定时流动相析出

各位虫友：大家好~
最近做了一种类似阿奇霉素的大环内脂化合物。HPLC测定含量时，使用流动相是磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇，流动相析出，且响应值较低，怎么办啊~ 谢谢啦

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1楼 2013-03-04 16:43:46

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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
古可ぷ: 金币+5, DRDEPI+1, 专业啊 2013-03-04 19:10:37
wangtian3778: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-03-05 08:04:08

析出原因分析：
1、磷酸盐浓度太高，一般10~30mM
2、流动相组分，有机相比例太高
3、流动相与样品相容性差

响应值低原因分析：
1、样品与流动相相容性差
2、波长选择不宜，可选最大吸收波长或最佳吸收波长
3、检测器性能问题（因为已出现问题，这种情况就不太可能了，几率很低）

改进方法：
1、了解化合物的结构、分子量、pKa、UV、样品浓度范围、溶解度等
2、参照相关文献检测体系，稍加改进
3、既然流动相体系为反相，流动相可以改为磷酸盐缓冲液-乙腈，没必要搞那么复杂吧？

好久没搞液相了，大概就说这些吧。

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守候在风中的宁静。

2楼2013-03-04 17:23:56

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wangtian3778

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2013-03-04 17:23:56
析出原因分析：
1、磷酸盐浓度太高，一般10~30mM
2、流动相组分，有机相比例太高
3、流动相与样品相容性差

响应值低原因分析：
1、样品与流动相相容性差
2、波长选择不宜，可选最大吸收波长或最佳吸收波长
...

谢谢您~ 我是帮课题组咨询的，因为测该药物的时候，流动相比例不好调整，不是前沿就是拖尾。谢谢您的意见，哈哈

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3楼2013-03-05 08:03:57

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