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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相HPLC峰分不开
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萨格拉斯之怒

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相HPLC峰分不开 已有5人参与

液相HPLC峰分不开，

位置不确定，样品中含有1-氨基蒽醌，1-氨基蒽醌-2-磺酸，邻二氯苯以及1-氨基蒽醌磺化副产物，样品用甲醇溶解。怎样才能跑出好点？

液相HPLC峰分不开
IMG_20150804_162521.jpg


液相HPLC峰分不开-1
IMG_20150804_162501.jpg
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1楼 2015-08-05 09:28:10
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
什么柱子，什么流动相，什么方法？
只从2张图来看，出峰时间太快了。降低流动相里有机相的比例。
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2楼2015-08-05 10:52:24
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cpuclz

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 萨格拉斯之怒 at 2015-08-05 13:17:59
C18 柱子，流动相是甲醇与缓冲盐，比例是 75：25...

最简单的方法，降低甲醇的比例，延长保留时间。
尽量用流动相溶解样品。
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5楼2015-08-05 13:45:44
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liuhaifen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先可以调节流动相的比例，增大缓冲盐比例；其次还可以通过降低流速；最后还可以尝试梯度方法；对于这样差不多的物质，还是比较头痛的，我之前也遇到过，当时局限于20分钟走完，所以也尝试换色谱柱，没有找到合适的，也希望群里有高手，推荐一款色谱柱。
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6楼2015-08-05 21:21:42
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这几个都溶于水，你就用低比例的有机相做就好了，加一点点酸在里面估计会好一些
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7楼2015-08-06 08:43:25
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

目测30-50之间的比例应该OK,这几个东西好分，除了是水溶外
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8楼2015-08-06 08:44:38
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周筠翔

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据你进样浓度的上升，各物质分离度降低的现象可以做一下几点处理：
1、降低流速，降低柱温，使保留时间在10-15分钟；
2、调节流动相中甲醇的含量，你可以多尝试，找到最佳比例。暂时不要加酸碱体系，因为你的样品比较稳定，加了酸碱反而增加了你的工作量；
3、尝试酸碱体系；
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生活在于永不放弃
12楼2015-08-07 09:15:37
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普通回帖

萨格拉斯之怒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cpuclz at 2015-08-05 10:52:24
什么柱子，什么流动相，什么方法？
只从2张图来看，出峰时间太快了。降低流动相里有机相的比例。

C18 柱子，流动相是甲醇与缓冲盐，比例是 75：25
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3楼2015-08-05 13:17:59
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萨格拉斯之怒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cpuclz at 2015-08-05 10:52:24
什么柱子，什么流动相，什么方法？
只从2张图来看，出峰时间太快了。降低流动相里有机相的比例。

C18 柱子，流动相是甲醇与缓冲盐，比例是 75：25
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4楼2015-08-05 13:43:05
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萨格拉斯之怒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cpuclz at 2015-08-05 10:52:24
什么柱子，什么流动相，什么方法？
只从2张图来看，出峰时间太快了。降低流动相里有机相的比例。

第一幅图进样量为5µL，第二幅图是10µL。进样量增加，响应值没有升高是怎么回事？
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9楼2015-08-06 10:15:11
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美丽的明天

新虫 (初入文坛)
尝试用梯度试试
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10楼2015-08-06 10:44:58
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