应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC样品出峰与流动相的关系
121/2返回列表12下一页
查看: 2571  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

晓风眷月

金虫 (正式写手)

[求助] HPLC样品出峰与流动相的关系 已有6人参与

前段时间用HPLC做个样品，这个样品在水中是可溶的，在乙腈中比较难溶，然后师姐在做这个样的时候跟我说，要把水的比例调大些，更容易出峰，此时，我有点困惑，因为一直都认为在反相柱里，乙腈这种相比水来说极性小的比例越大不是应该更早出峰么，而在分离两种化合物的时候，在确定用反相柱之后，出峰顺序不也应该只是跟化合物本身的极性有关，而与流动相比例是无关的么？我认识有什么误区么？求解
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
感性大于理性的理科人
1楼 2015-07-31 16:12:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ethernet3399

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
你的认识仅停留在理论上。实际操作时也要考虑到流动相对于物质的溶解度。试想，如果一个物质在流动相中不溶解，会出峰吗？第二，出峰顺序理论上与化合物极性有关，但是换不同的色谱柱可能峰位颠倒，这又作何解释呢？所以理论是一方面，但是不可以绝对化，毕竟是实验科学。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2015-08-02 05:56:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuhaifen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
出峰时间和多种因素有关，流动相组成及其比例，柱子类型，柱温，流速这些都是有关系的，建议在具体实验前先做个HPLC实验条件优化。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-08-02 15:49:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hudreamy

铁杆木虫 (职业作家)
你师姐的意思是增加溶解性，所以水的比例高些，这样也防止你的样品在柱子中析出来把柱子堵了，出峰时间和流动相是肯定有关系的，你可以实践一下，用不同的流动相比例走一下就知道了
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2015-08-03 00:03:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

猫猫爱吃小鱼

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样品出峰时间与色谱柱也有关系
赞一下 回复此楼
2楼2015-07-31 17:12:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

727701445

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
出峰时间当然和流动相的比例有关啊，流动相的比例不同或者比例阀出故障，出峰时间都会改变的
赞一下 回复此楼
4楼2015-08-02 15:44:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晓风眷月

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ethernet3399 at 2015-08-02 05:56:01
你的认识仅停留在理论上。实际操作时也要考虑到流动相对于物质的溶解度。试想，如果一个物质在流动相中不溶解，会出峰吗？第二，出峰顺序理论上与化合物极性有关，但是换不同的色谱柱可能峰位颠倒，这又作何解释呢？ ...

那么现在色谱柱确定是反相的了之后，如果一个化合物易溶于水难溶于乙腈，那么是否水相多点更容易出峰呢？
赞一下 回复此楼
感性大于理性的理科人
6楼2015-08-02 22:28:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ethernet3399

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
引用回帖:
6楼: Originally posted by 晓风眷月 at 2015-08-02 22:28:15
那么现在色谱柱确定是反相的了之后，如果一个化合物易溶于水难溶于乙腈，那么是否水相多点更容易出峰呢？...

这个不好说，按道理，水是没有什么洗脱能力的，在反相色谱中。样品在乙腈中溶解度低，也不至于一点也不溶解吧？比如1mg/ml的溶解度可以满足吗？你应该是做分析对吧？我在做分离纯化时遇到很多例子，出峰后样品在试管中析出，出峰也还正常。不过这样确实有风险。就你的这个例子，你可以试试看，我认为还是应该增加乙腈的比例才能把样品洗脱下来，或者样品在甲醇中溶解度怎样？是否可以把有机相换成甲醇

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
8楼2015-08-03 06:53:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

da1234mao

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
回一个，反项中原理跟你说的一致，更容易岀峰不知道表述什么，更多的水分可能岀峰时间更合适的保留时间。当然考虑下堵柱子的情况，比如氯化钠这种。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
9楼2015-08-03 08:38:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

萌萌的怪阿姨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 晓风眷月 at 2015-08-02 22:28:15
那么现在色谱柱确定是反相的了之后，如果一个化合物易溶于水难溶于乙腈，那么是否水相多点更容易出峰呢？...

更容易出峰和更快出峰是两回事吧
水的比例增大，溶解度更高，那么峰应该会比较大
你的柱子是反相色谱柱，水的比例增大，流动相极性更大了，出峰会变慢
这是我个人的理解，你在理一下思路，看是不是这么回事
赞一下 回复此楼
10楼2015-08-03 11:19:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 晓风眷月 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +10 Tide man 2026-08-11 10/500 2026-08-12 20:59 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 6/300 2026-08-12 16:26 by Tide man
[基金申请] 长年满屏的广告，版主太不责任了。基金也等的急 +4 gltch 2026-08-12 4/200 2026-08-12 16:08 by eulota
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭