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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC样品出峰与流动相的关系
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晓风眷月

金虫 (正式写手)

[求助] HPLC样品出峰与流动相的关系已有6人参与

前段时间用HPLC做个样品，这个样品在水中是可溶的，在乙腈中比较难溶，然后师姐在做这个样的时候跟我说，要把水的比例调大些，更容易出峰，此时，我有点困惑，因为一直都认为在反相柱里，乙腈这种相比水来说极性小的比例越大不是应该更早出峰么，而在分离两种化合物的时候，在确定用反相柱之后，出峰顺序不也应该只是跟化合物本身的极性有关，而与流动相比例是无关的么？我认识有什么误区么？求解
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感性大于理性的理科人
1楼2015-07-31 16:12:33
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ethernet3399

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
你的认识仅停留在理论上。实际操作时也要考虑到流动相对于物质的溶解度。试想，如果一个物质在流动相中不溶解，会出峰吗？第二，出峰顺序理论上与化合物极性有关，但是换不同的色谱柱可能峰位颠倒，这又作何解释呢？所以理论是一方面，但是不可以绝对化，毕竟是实验科学。

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-08-02 05:56:01
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猫猫爱吃小鱼

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样品出峰时间与色谱柱也有关系
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2楼2015-07-31 17:12:15
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727701445

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
出峰时间当然和流动相的比例有关啊，流动相的比例不同或者比例阀出故障，出峰时间都会改变的
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4楼2015-08-02 15:44:35
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liuhaifen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
出峰时间和多种因素有关，流动相组成及其比例，柱子类型，柱温，流速这些都是有关系的，建议在具体实验前先做个HPLC实验条件优化。
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5楼2015-08-02 15:49:01
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